高效液相色谱仪HPLC使用资料点滴.docx

高效液相色谱仪使用点滴二、WatersHPLC2695分离单元使用操作 /dvbbs/dispbbs.asp?boardID=151ID=87627page=11、开机自检 打开电源开关，仪器开始自检（4～5min），待屏幕上方出现“Idle”字样表示自检成功。 2、脱气（Degas） 按面板右下方“Menu/Status”键进入“Status（1）”界面，移动光标　　 至“Degasser Mode”，按Enter选择“On”，打开在线脱气。 注意： 自动脱气机？（1） 在开启除气装置时，要确认所有溶剂管路都充满溶剂；若没有溶剂时请执行溶剂的Dry Prime动作。 （2） 当溶剂流速为0.0时，一定要关闭除气装置，不然可能会过度真空使除气槽(vacuum chamber)破裂，而造成移动相外流出来. （3） 当溶剂的管子是空的时候，或是更换溶剂的时候，先执行Dry Prime。按 “Menu/Status” 键，进入Status (1)画面，按 “Direct Function” 功能键，选择Dry Prime，按Enter。（4） 冬天脱气时，室温应大于10℃。3、设定柱温（可选项） 在“Status（1）”界面，移动光标至“Col Htr Set”，输入目标温度按Enter即可（可在工作站方法中设置）。 注意： 设定温度应高于室温5℃低于60℃。 4、Prime Seal Wash（清洗柱塞杆） 按“Menu/Status”键回到“Menu”界面，按下排功能键“Diag”，然后再按下排功能键“Prime Seal Wsh”，按“Start”键，冲洗1~2min后，先按“HALT”键，再按“CLOSE”键，结束柱塞杆的清洗。 注意： （1） 清洗柱塞杆的溶剂可以用水，或5%-10%甲醇（抑菌）。 （2） 可以每天开机后进行，或结束实验时进行。流动相中有盐，结束实验时一定要清洗，仪器不自动进行。5、Wet Prime 在“Status（1）”界面中“Composition”下，选择将用到的溶剂通道为“100%”，按液晶屏幕右下角“Direct Function”键，移动光标选择“2 Wet Prime”，“OK”，流速及时间可使用默认值，也可自行设定（如：5ml/min，3min），“OK”即可。 将每一个会用到的溶剂通道按照上述操作一次。6、Purge Injector（注射器排气泡及清洗） 进入“Direct Function”界面后，选择“3 Purge Injector”，“OK”，默认数值为6，“OK”。 7、Prime Needle Wash（清洗注射针） 按“Menu/Status”键回到“Menu”界面，按下排功能键“Diag”，进入“Diagnostics”界面，按下排功能键之“Prime Ndl Wsh”，按“Start”键，默认30 秒钟，按“Close”键，即可返回“Diagnostics”界面。 注意： （1） 以上4～7操作步骤为溶剂系统前处理过程，建议每天开机后依次进行。 （2） 若发现注射器中有气泡，则可重复6的操作步骤直至排除。 （3） 如果流动相中含有盐类，则实验结束后必须用水清洗柱塞杆（即操作4）。8、平衡柱子 在“Status（1）”界面上，按流动相比例设定各通道溶剂比例后，再Wet Prime操作一次，然后设置流速，平衡色谱柱30～60min。 9、放置样品 拉开样品转盘舱门，将盛有待测样品溶液的样品瓶放入转盘中，记下样品瓶号，关上舱门。 10、检测样品 打开工作站，设置仪器方法、方法组、自动进样序列等，监视基线、检测样品。 11、分析处理数据、打印报告 12、清洗注射器、针、柱塞杆 参见上述4、7的操作步骤。 13、清洗色谱柱 用水冲洗柱子40-60min（视柱子规格不同，流速通常1ml/min）；然后用甲醇或乙腈冲洗柱子40min（流速1ml/min）。 14、关机 关掉电源开关。 氨基柱是同时可以用于正相条件和反相条件的，/dvbbs/dispbbs.asp?boardID=148ID=29087page=1这一点很多用户都已经知道；但是要注意到的是：正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的，对这一点的忽略可能会带给使用者一些麻烦。对于新购买到的柱子，首先请注意打开分析测试说明书，了解柱子的保存溶剂。如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不会互溶，请先用异丙醇过渡。过渡过程中注意因异丙醇粘度较大，会导致柱压很高，适当调低流速即可。如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类，建议在用分析流动相之前，先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡，这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。柱效检测：我用于判断一个用户是否有经验的指标之一，是用户是否习惯配制一些柱效检测标准溶液。说到柱效检测，我可以向