实验目的学习从动物组织中提取DNA与其含量纯度测定的原.pptVIP

实验目的 学习从动物组织中提取DNA及其含量、纯度测定的原理和方法 掌握离心机的使用方法 兔肝脱氧核糖核酸（DNA）的提取和测定 在0.15M的氯化钠溶液中脱氧核糖核蛋白的溶解度最低。用0.15M氯化钠溶液洗涤可洗去其它物质。 沉淀用SDS处理，SDS使蛋白质与DNA解离，再用氯仿－异丙醇抽提，将蛋白质沉淀除去，而DNA则溶解。 DNA溶液用乙醇沉淀析出。 实验原理 实验操作 1. 弃上清留沉淀 兔肝 称取4 g 加 8ml 1X SSC 1X SSC洗 两次 取8ml匀浆液 离 心 匀浆、过滤 2.弃上清留沉淀 加至8ml 1X SSC 离 心 加至 8ml 0.15M NaCl-0.1M Na2EDTA 离 心 3.弃上清留沉淀 （脱氧核糖核蛋白） 加约2倍 体积 95% 乙醇 沉淀 加 0.15M NaCl-0.1M Na2EDTA至4ml 搅拌10min 逐滴加入0.5ml 15% SDS 加1ml 5M NaCl 去塞！离心 加塞反复 倒置抽提 10min 吸取上清液 勿吸到中间层！ 等体积氯仿-异丙醇混合液 DNA析出 用玻棒挑出 挑取DNA至一离 心管(小烧杯)用10ml 0.01N NaOH溶解 重复 一次 轻搅 10min 注意事项 尽可能避免DNA的断裂 1. 匀浆时应保持低温，且匀浆时间应短； 2. 实验中使用的吸取DNA水溶液的