孕酮检测准操作流程.docVIP

概述 孕酮是一种分子量为314.5道尔顿的甾体类激素。主要形成于黄体细胞以及怀孕期胎盘中。孕酮水平与黄体的发育和萎缩有关。但是在女性周期的卵泡期几乎检测不到孕酮，在排卵前一天可观察到孕酮水平升高。黄体期孕酮合成增加。在后半周期孕二醇作为孕酮主要的降解产物随尿排出体外。孕酮造成子宫内膜腺体组织（分泌阶段）增加，为受精卵着床做准备。怀孕期间孕酮抑制子宫肌层收缩。乳腺中，在雌激素作用的基础上，孕酮促进乳腺腺泡增殖和分泌物的分泌。检测孕酮可用于检测排卵以及黄体期的评估,有助于生育诊断 1 目的 规范孕酮检测测试，确保检测结果准确性和重复性 2 检测方法和原理 2.1检测方法：竞争法 2.2检测原理：孕酮检测是一种竞争性的免疫测定方法，使用直接化学发光技术。在标记试剂中，病人样品中的孕酮结合到吖啶酯标记的小鼠单克隆抗孕酮抗体上。在固相试剂中，游离的抗体与孕酮衍生物结合在一起，并通过共价键结合到顺磁性颗粒上 3 标本采集与保护 新鲜无溶血血清 遵守以下推荐的血清标本处理，运行和储存步骤 3.1用真空采样管采集血液标本时须遵守常规注意事项 3.2离心前使标本完全自然形成凝块 3.3全程保证样品管的密闭状态 3.4尽快分离血清，并及时测定 3.5如果标本不能在24小时内检测或运送标本时，将标本保存在4℃ 3.6冷藏标本室温放置20分钟后再测定； 3.7冷冻标本室温解溶后放置20分钟后再测定 3.8不符合标本处理 3.8.1溶血和乳糜血标本在报告单的备注栏注明 3.8.2标本量过少的标本，严重溶血和乳糜血标本与临床沟通并将标本退回，填写不合格标本拒接登记。 4 试剂和设备 4.1试剂 SIEMENS原装配套试剂 4.1.1试剂组成 标记试剂：5.0mL盒，在缓冲盐水中用吖啶酯标记的单克隆小鼠抗人孕酮抗体(~20ng/mL)，含叠氮化钠（0.1%)和防腐剂。 固相试剂：10.0mL/盒，在磷酸盐缓冲液中结合到顺磁性颗粒的孕酮衍生物（~60ng/mL)，含叠氮化钠（0.11%)和防腐剂。 释放剂：类固醇释放剂(2.2Mg/mL)，置于含叠氮化钠（0.1%)和防腐剂的缓冲液中。 4.1.2试剂准备：手工混合所有试剂包。肉眼检查试剂底部以确保所有颗粒分散均匀并处悬浮状态，然后将混合物载入系统直接使用 4.1.3试剂保存 试剂2~8℃避光保存，并保持竖直向上 4.2质控品 SIEMENS原装配套质控品 4.3校准品 SIEMENS原装配套标准品。 4. 4警告和注意事项 4.4.1只可用于体外诊断； 4.4.2试剂中含有叠氮钠，请小心处理，请勿吞服或与皮肤粘膜接触！叠氮钠在与铜或铅等重金属接触后会产生有毒的叠氮化物； 4.4.3试剂盒的测定结果仅作为临床各种疾病的辅助诊断依据 4.5仪器 ADVIA Centaur CP 全自动化学发光免疫分析仪 5 操作程序 5.1检测过程流程 签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存 5.2样本签收 严格按标本接收程序签收标本 5.3标本处理 以3000r/min，离心6~10min，分离血清上机测定，若标本不能及时检测，将分离血清冷藏于2~8℃的冰箱内 5.4标本检测 5.4.1手工编排测试项目：在主界面选中样本区域 →选择样本架 →选择样本 →点击Samples区域中的样本类型选择按钮→切换至样本类型→选择样本ID编排区→没有通过扫描样本管条形码输入ID号的样本，在此处手工输入样本ID →然后在Assay Selection 区域选择测试项目 5.4.2样本运行 确认样本装载，必要的样本信息输入完毕→确认所有耗品及试剂已装载 →按START键 开始运行样本。 5.5检验后标本保存 保存在标本冰箱内，保存期为7d 6 校准程序 6.1校准品的准备和储存 将校准品从冰箱中取出，加5ml蒸馏水复融，轻轻旋转摇匀，室温放置30min，待充分混匀后分装。-20℃冰冻保存可保存20d，复融后2~8℃可稳定24h。 6.2校准条件 在室内质控失控，或使用新批号试剂，或更换仪器主要配件，或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为28d 6.3校准程序 参见生化组的校准操作程序 7 质量控制程序 7.1控制品的准备和储存 每瓶准确加入5.0ml蒸馏水复融，轻轻旋转摇匀，室温放置30min待充分溶解后分装，保存于-30℃冰箱，启用前取出，室温放置30min待充分融化后使用，2~8℃可稳定24h。 7.2控制品水平和分析批长度 每24h至少进行1批。 7.3质控操作程序 参见生化组的质量控制操作程序。 8 性能参数 8.1不准确度 ±12.5% 8.2精密度 ＜8.33% 8.3线性范围 0.21ng/ml~60ng/ml 9 生物参考区间 黄体期3.34-28.03ng/ml 卵泡期0.15-1.4ng/