基因工程工程的应用.pptVIP

一、　获取目的基因 1.基因的“剪刀”──限制性内切酶（限制酶） 　　一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切割点上将DNA分子切断。 专一性（eg：EcoRI限制酶） GAGACTGATTGGCCTTAAGCTCGAG CTCTGACTAACCGGAATTCGAGCTC GAGACTGATTGGCCTTAA CTCTGACTAACCGG GCTCGAG AATTCGAGCTC 除了某些病毒以外，限制性内切酶只在原核生物中发现 识别位点和切割位点 GATCC G G CCTA GGA CCT TCC AGG 黏性末端 平末端 3、基因的运输工具——运载体 常用的运载体：质粒、噬菌体和动植物病毒 标记基因，便于进行检测。 　　运载体必须同时满足三个要求：①能与目的基因结合；②能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达；③比较容易得到。 用与提取目的基因相同的限制酶切割质粒使之出现一个切口，将目的基因插入切口处，让目的基因的黏性末端与切口上的黏性末端互补配对后，在连接酶的作用下连接形成重组DNA分子。 第二步、