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大鼠急性羰基镍中毒各脏器谷光 甘肽过氧化物酶水平动态观察 实验研究三要素三原则分析 羰基镍 1、剧毒化合物 羰基镍是镍和一氧化碳在一定压力下反应而制成的一种金属化合物，是化学冶金工业生产中所遇到的剧毒化合物之一 2、应用广泛 主要用于制高纯镍粉，用于电子工业，及制造塑料中间体，也用作催化剂 3、毒效应多 易经呼吸道吸收，其可诱导氧化应激发生，其中毒可累及机体多种重要器官，导致各种毒效应 开展对其损伤机制研究有利于安全生产和临床急救 研究目的 探讨大鼠急性羰基镍中毒各脏器谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-Px) 活力变化 实验方法 动物染毒分组与处理： SD大鼠200只 每组40只 低剂量羰基镍实验组 20mg/m3 中剂量羰基镍实验组 135mg/m3 高剂量羰基镍实验组 250mg/m3 正常对照组 未给予特殊处理 氯气染毒对照组 250mg/m3 静态吸入染毒 染毒时间为30 min 谷光甘肽过氧化物酶活力测定 染毒后1、2、3 和7 d 取材 每次每组取10只 麻醉处死，取肺、肝、肾、 心和脾脏样本 组织匀浆制备 组织蛋白水平测定 测定肺、肝、肾、心和脾脏GSH-Px 活力 化学比色法 实验研究三要素三原则 三要素 受试对象 处理因素 实验效应 三原则 随机原则 对照原则 重复原则 实验研究三要素 实验对象：无特定病原体（SPF）SD大鼠 200只 体质量 180-200g 处理因素：（1）羰基镍 （2）染毒方式：静态吸入染毒30min （3）染毒剂量： 低剂量实验组染毒质量浓度为 20mg/m3 中剂量实验组染毒质量浓度为 135mg/m3 高剂量实验组染毒质量浓度为 250mg/m3 实验效应：（1）镍可引起机体氧化应激反应，通过产生超氧阴离子自由基损伤细胞；谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-Px) 是人体内主要的抗氧化酶之一，可清除由活性氧( ROS) 和超氧阴离子自由基诱发的脂质过氧化物 （2）确定谷光甘肽过氧化物酶为效应指标 （3）GSH-Px测定方法 应用GSH-Px测试盒使用化学比色测定法 实验研究三原则 随机原则： 随机化使大量难以控制的非处理因素在实验组和对照组中的影响相当，并可归于实验误差之中 （1）实验动物分组 将200只大鼠随机分成5组，每组大鼠40只，雌雄各半 （2）于染毒后1、2、3和7天取雌雄大鼠各5只 对照原则： 能较好地控制非处理因素对实验结果的影响，从而将处理因素的效应充分显露出来，将效应归因于处理因素 （1）正常对照组 未予特殊处理 （2）氯气染毒对照组 氯气为急性呼吸道刺激性毒性气体，其中毒机制及治疗手段已较为明确，可引起严重的氧化损伤，染毒质量浓度为250mg/m3 重复原则： 在相同实验条件下进行多次实验或多次观察，以提高实验的可靠性和科学性 （1）整体实验的重复 （2）用多个受试对象进行重复 （3）同一受试对象的重复观察 表现为：数量上 每组动物数为40只 不足：每只动物每种脏器的谷胱甘肽过氧化物酶活力只测定一次 谢谢！ 谢谢 !