刘小龙 循环肿瘤DNA（ctDNA）检测策略及临床意义课件.pptVIP

循环肿瘤DNA(ctDNA)检测策略及临床意义;肿瘤诊疗的困境：早期诊断困难，错过最佳治疗时机；易复发转移，预后差；放化疗易产生耐受；缺乏有效的治疗靶点等。 早诊早治，实时监控、靶向用药及个体化诊疗是提高肿瘤远期生存率、降低死亡率的关键。;肿瘤诊断方法;循环肿瘤DNA(ctDNA);ctDNA发展简史;ctDNA优势;ctDNA检测技术;敏感度;数字PCR;利用数字PCR监测肺癌病人中第一次服用埃罗替尼抗肿瘤药物后的血浆EGFR突变情况。 经过治疗后，所有病人的EGFR突变都出现下降，其中有8个病人突变完全消失。 有6个病人的EGFR突变在后续出现上升，提前揭示疾病进展。另外3个病人的EGFR突变没有变化，病情无明显进展。 ;结合数字PCR与流式技术，利用特异性PCR引物扩增目标突变区后，与磁珠（磁珠上固定有特异的PCR 引物）混合进行油包水单分子扩增反应。反乳化作用后，利用不同颜色的荧光探针结合磁珠上的PCR产物，发出红色或绿色荧光。使用流式细胞仪分析磁珠颜色来确定突变情况。 ;利用肿瘤组织进行sanger测序定义肿瘤组织的基因突变； 再利用Beaming技术检测18例癌症病人中192份血浆样本中ctDNA的突变情况，检测灵敏度可达到0.005%。 ;;Comparison of ctDNA, CEA and imaging dynamics in individual stud