选修一5.3《血红蛋白的提取和分离》5.pptVIP

; 本课题学习目标; 本课题学习重点和难点; 2003年4月14日宣布人类基因组序列图完成，这标志着进入了后基因组和蛋白质组时代;血液;血红蛋白;1.分离生物大分子的基本思路：;（一） 凝胶色谱法（分配色谱法）;4.凝胶色谱法分离蛋白质的原理和具体过程;凝胶色谱法分离蛋白质过程的动画演示; （二）缓冲溶液; 缓冲溶液的组成及分类; （三） 电泳：;; 聚丙烯酰胺凝胶电泳; 蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决 于它所带净电荷的多少以及分子的大小等因素。 （SDS的作用）为了消除净电荷对迁移率的影响， 可以在凝胶中加入SDS。 ;用SDS测定蛋白质分子量的方法; 二、实验操作;采集得到血液;柜式离心机;初次离心后的结果;3次洗涤后的结果;(2)血红蛋白的释放：;磁力搅拌器;搅拌器转子;搅拌器正在工作;甲苯层（无色透明）;(4)透 析：;透析过程动画演示;利用透析袋透析;2.凝胶色谱操作:;（2）凝胶色谱柱的装填;装配好的凝胶柱; ;（3）样品加入与洗脱;（3）样品加入与洗脱;开始进行层析;收集得到的纯化后的蛋白;思考下面的问题：;（三）SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳（选做）; 观察你处理的血液样品离心后是否分层（见教科书图5-18），如果分层不明显，可能是洗涤次数少、未能除去血浆蛋白的原因。此外，离心速度过高和时间过