单克隆抗体制备实验.pptxVIP

单克隆抗体制备实验; 目录 ;一、实验目的;二、实验原理;三、实验材料;四、实验步骤(1);3. 收集Sp2/0细胞?? 取已长满的Sp2/0细胞2~3瓶，用弯头尖吸管将细胞吹下来，置于50ml离心管中，原瓶补液继续培养 ↓ 4. 清洗脾细胞和Sp2/0 细胞 800rpm，离心5min ↓ 弃上清，轻轻磕几下50ml离心管底部（使细胞团块松散），加入两吸管无血清1640，轻轻吹打均匀，补培养液至20ml ↓ 脾细胞和Sp2/0 细胞，800rpm，离心5min ↓ 5. 融合 ? ?? ?? ?将PEG1500置于37℃水浴锅上，熔化后，加入0.5ml无血清1640，混匀，即为50%PEG ↓ 取离心好的脾细胞和Sp2/0细胞，弃上清（注意保持这个姿势）用滤纸条轻轻沾去管壁上的培养液（保证PEG不被稀释）。将离心管放到37℃水浴中（用一小烧杯制备水浴），1min加入PEG（边加边搅），搅30sec；静止1min。 ;四、实验步骤(3);五 . 注意事项