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坐骨神经-腓肠肌标本制备骨骼肌的单收缩、收缩总和与强直收缩 目的要求 1．学习蛙类动物双毁髓的实验方法。 2．学习并掌握坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。 3. 学习神经-肌肉实验的电刺激方法和记录肌肉收缩的方法； 4. 观察刺激强度与肌肉收缩反应之间的关系； 5. 掌握阈刺激、阈下刺激、阈上刺激、最大（适）刺激等概念。 6．学习应用Pclab系统。 实验原理 对于单根神经纤维或肌纤维来说，对刺激的反应具有“全或无”的特性。 神经－肌肉标本是由许多兴奋性不同的神经纤维或肌纤维组成的。 在保持足够的刺激时间（脉冲波宽）不变时，刺激强度过小，不能引起任何收缩反应；随着刺激强度增加到某一定值，可引起少数兴奋性较高的运动单位兴奋，引起少数肌纤维收缩，表现出较小的张力变化。该刺激器度称为阈强度，具有阈强度的刺激称为阈刺激。 实验原理 此后随着刺激强度的继续增加，会有较多的运动单位兴奋，肌肉的收缩幅度及产生的张力也不断增加，此时的刺激称为阈上刺激。 但当刺激强度增大到某一临界值时，所有的运动单位都被兴奋，引起肌肉最大幅度的收缩，产生的张力也最大。此后，再增加刺激强度，也不会再引起反应的继续增加。 可引起肌肉发生最大收缩反应的最小刺激强度为最适刺激强度，该刺激叫最大（适）刺激。 动物与器材 蛙；任氏液；肌槽、张力换能器（50～100g）、支架、双凹夹、Pclab系统（含输入接线和刺激输出线）、常用手术器械、锌铜弓、蜡盘、培养皿、滴管、棉线、橡皮泥。 方法步骤 1. 双毁髓 2. 剥制后肢标本 3. 分离两后肢（耻骨联合） 4. 分离坐骨神经 5. 分离股骨头(2cm) 6. 游离腓肠肌，肌腱处打结。 7. 检验标本 实验步骤 8. 进入PcLab实验内容 9. 连接刺激输出线、肌槽、张力换能器、万能支架 10.设定刺激参数，预采样。 11.放上坐骨神经-腓肠肌标本，观察，测定 11.保存和打印实验结果 注意事项 保留股骨头完整关节，不能从关节面之间剪开 实验后利用蛙躯体前部练习双毁髓 在本实验要提交的数据： （1）阈刺激和最适刺激参数； （2）强直收缩图。 神经干复合动作电位 及其传导速度的测定 目的要求 了解蛙类坐骨神经干的单相和双相动作电位的记录方法；理解兴奋传导的概念。 掌握蛙离体神经干动作电位传导速度的测定方法。 初步熟悉电生理学实验方法；进一步掌握Pclab系统的应用方法。 基本原理 神经干在受到有效刺激后，可产生动作电位，标志着神经发生了兴奋。动作电位一经产生，即可向外传播，此即为神经冲动。 如果将两个引导电极分别置于正常完整的神经干表面，当神经干的一端兴奋之后，兴奋波会先后通过两个引导电极（r1-r1’），可记录到两个方向相反的电位偏转波形，称为双相动作电位。 如将两个引导电极之间的神经麻醉或损伤，兴奋波只能通过第一个引导电极，不能传导至第二个引导电极，故只能记录到一个方向的电位偏转波形，称为单相动作电位。 坐骨神经干是由许多不同类型的神经纤维组成的，因此其动作电位是一种复合动作电位。 由于各类神经纤维的兴奋阈值并不相同，所以在一定范围内，该复合动作电位的幅值可随刺激强度的变化而发生改变。这一点有别于单根神经纤维的动作电位。 动作电位在神经纤维上的传导具有一定的速度。不同类型的神经纤维传导速度各不相同。总体说来，直径粗的神经纤维传导速度快，直径相同的有髓神经纤维比无髓神经纤维快。蛙类坐骨神经干中以Aα类纤维为主，其传导速度在室温下约为35～40m／s。 测定神经纤维上神经冲动的传导速度（V）时，在远离刺激点的不同距离处分别引导其动作电位。两引导点之间的距离为d，在两引导点分别引导出的动作电位的时相差为t，再按照以下公式来计算冲动速度：V=d/t(单位：m/s)。 动物与器材 蛙；任氏液、神经屏蔽盒、Pclab系统（含输入接线和刺激输出线）、常用手术器械、蛙板、培养皿、棉线。 方法与步骤 1．制备坐骨神经干标本 2．Pclab系统的软硬件设置 3．放置标本 4．实验采样 1．制备坐骨神经干标本： 制备方法基本同实验1，剥离蛙一侧后肢的坐骨神经。坐骨神经下行至腘窝处分为两支：内侧为胫神经，走行表浅；外侧为腓神经。将神经干标本剥离得尽可能长些，即：上自脊神经发出部位，下沿胫、腓神经走向一直分离至踝关节附近。 剪去神经干的所有分支侧支；尽量把神经干周围的结缔组织剔干净（但切勿损伤神经干），结扎坐骨神经干的脊柱端及胫、腓神经的足端；在靠近趾部处剪断神经游离神经干。将制备好的神经标本放入任氏液中稳定5min。 2．Pclab系统的软硬件设置: ⑴标准配置 ⑵实验模板选择 ⑶导线及器材连接：根据实验界面，用信号输入线把Pclab硬件相应的采样通道与神经屏蔽盒的两对记录电极连接起来，用刺激输出线把Pclab硬