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结核分枝杆菌 结核分枝杆菌 简介 一、生物学性状 二、致病性 三、临床病征 四、病理性改变 简介 结核分枝杆菌（M. tuberculosis）简称为结核杆菌（tubercle bacilli）。结核杆菌属于放线菌目分支杆菌科分支杆菌属。 对人类致病的有人型结核杆菌和牛型结核杆菌，非典型结核杆菌也可引起类似结核样病变，但少见。 结核病在人体的发生有两个两阶段：第一阶段：暴露过结核杆菌的个体受到感染；第二阶段：感染的个体发展为结核病，在感染后的第一或第二年发展为活动性结核病的风险最大，潜伏的感染可持续终身。 一、生物学性状 （1）形态与染色 　　结核分枝杆菌为细长略带弯曲的杆菌，大小（1～4）X（0.2～0.5）μm。牛分枝杆菌则比较粗短。 革兰染色不易着色，抗酸染色呈红色 以痰液直接涂片，结核分枝杆菌多为单个存在，有时呈V、Y、人字形排列。痰菌量多时，可排列成束状或集聚成团。 荧光染料金胺“O”染色，在荧光显微镜下观察呈金黄色荧光。 近年发现结核分枝杆菌在细胞壁外尚有一层荚膜。一般因制片时遭受破坏而不易看到。 （2）培养特性 专性需氧。最适温度为37℃，低于30 ℃不生长。结核分枝杆菌细胞壁的脂质含量较高，影响营养物质的吸收，故生长缓慢。 结核杆菌为专性需氧菌。营养要求高，在含有蛋黄、马钤薯、甘油和天门冬素等的固体培养基上才能生长。常用的有罗氏（Lowenstein-Jensen）固体培养基。 根据接种菌多少，一般2～4周可见菌落生长。菌落呈颗粒、结节或花菜状，乳白色或米黄色，不透明。 在液体培养基中可能由于接触营养面大，细菌生长较为迅速。一般1～2周即可生长，呈粗糙皱纹状菌膜生长。临床标本检查液体培养比固体培养的阳性率高数倍。 结核杆菌在罗氏固体培养基上的菌落形态 （3）生化反应 结核分枝杆菌不发酵糖类。与牛分枝杆菌的区别在于结核分枝杆菌可合成烟酸和还原硝酸盐，而牛分枝杆菌不能。 结核分枝杆菌大多数触酶试验阳性，而热触酶试验阴性; 非结核分枝杆菌则大多数两种试验均阳性。 热触酶试验检查方法是将浓的细菌悬液置68 ℃水浴加温20min，然后再加H2O2。 观察是否产生气泡，有气泡者为阳性。 （4）抵抗力 结核分枝杆菌细胞壁中含有脂质，故对乙醇敏感，在70%乙醇中2min死亡。 脂质可防止菌体水分丢失，故对干燥的抵抗力特别强。粘附在尘埃上保持传染性8～10d，在干燥痰内可存活6～8个月。 结核分枝杆菌对湿热敏感，在液体中加热62～63 ℃ 15min或煮沸即被杀死。 结核分枝杆菌对紫外线敏感，直接日光照射数小时可被杀死。 结核分枝杆菌对酸（3% HCl或6% H2SO4) 或碱（4% NaOH) 有抵抗力，15min不受影响。 (5)变异性 结核分枝杆菌可发生形态、菌落、毒力、免疫原性和耐药性等变异。 对异烟肼耐药与katG基因丢失有关。易感株有该基因，耐药株无。利福平主要作用于RNA多聚酶。编码该酶的基因(rpoB)突变则引起对利福平耐药。耐利福平株rpoB基因发生突变，敏感株则否。 二、致病性 　结核分枝杆菌不产生内毒素，也不产生外毒素和侵袭性酶类，其致病作用主要靠菌体成份，特别是胞壁中所含的大量脂质。脂质含量与结核杆菌的毒力呈平行关系，含量愈高毒力愈强。 （一）致病物质 荚膜 脂质 蛋白质 多糖质 核酸 1、荚膜 荚膜的主要成分为多糖，部分脂质和蛋白质。 作用： ①荚膜能与吞噬细胞表面的补体受体3（CR3）结合，有助于结核分枝杆菌在宿主细胞上的粘附与入侵； ②荚膜中有多种酶可降解宿主组织中的大分子物质，供入侵的结核分枝杆菌繁殖所需的营养； ③荚膜能防止宿主的有害物质进入结核分枝杆菌，甚至如小分子NaOH也不易进入。 2．脂质 ①索状因子 ： 是分枝菌酸和海藻糖结合的一种糖脂。能使细菌在液体培养基中呈蜿蜒索状排列。它能破坏细胞线粒体膜，影响细胞呼吸，抑制白细胞游走和引起慢性肉芽肿。若将其从细菌中提出，则细菌丧失毒力。 ②磷脂：能刺激单核细胞增生，并可抑制蛋白酶的分解作用，使病灶组织溶解不完全，形成干酪样坏死。 ③硫酸脑苷脂(sulfatide)：可抑制吞噬细胞中吞噬体与溶酶体的结合，使结核分枝杆菌能在吞噬细胞中长期存活。 ④蜡质D： 是一种肽糖脂和分枝菌酸的复合物，可从有毒株或卡介苗中用甲醇提出，具有佐剂作用，可激发机体产生迟发型超敏反应。 3.蛋白质 结核杆菌菌体内都含有数种蛋白质，其中重要的蛋白质是结核菌素(tuberculin)。结核茵素与蜡质D结合，能引起较强的迟发型变态反应。 引起组织坏死和全身中毒症状，并在形成结核结节中发挥一定作用。 4 .多糖质