专题2_课题_微生物的实验室培养.pptVIP

注意： 最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖 最常用的氮源是铵盐、硝酸盐 对异养生物而言，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源，如蛋白质 之所以补充生长因子，是由于缺少合成这些物质的酶或合成能力有限 稀释涂布平板法:是指将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 在稀释度足够的菌液里，聚集在一起的微生物将分散成单个的细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。 选择培养基 加入青霉素的培养基 加入高浓度食盐的培养基 不加氮源的无氮培养基 不加含碳有机物的无碳培养基 6支试管，分别加入9ml无菌水 1ml 101 1ml 102 1ml 103 1ml 104 1ml 105 1ml 106 ⑵稀释涂布平板法： a.梯度稀释菌液： 菌液 微量 移液器 ⑵稀释涂布平板法： a.梯度稀释菌液： b.涂布平板： 不超过0.1ml 各梯度分别涂布3个平板 1个不涂布作空白对照 滴 灼 冷 涂 稀释103倍 稀释104倍 稀释105倍 答：应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。 问题讨论P19 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？ 3.菌种的保存 接种到固体斜面培养基，菌落长成后置于4℃冰箱保存。 2.微生物的恒温培养 ⑵.长期保存： 甘油冷冻管藏法 ⑴.临时保藏： 三.结果分析与评价 ㈠.培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。 ㈡.接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。 ㈢.是否进行了及时细致的观察与记录 培养12h与24h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到其他一些细微的变化。 本课题知识小结: 稀 平板法 鉴别培养基 用途 合成培养基 天然培养基 化学成分 物理性质 用途 特点 培养基种类 划分标准 培养基的种类 不加凝固剂 加凝固剂，如琼脂 工业生产 观察微生物的运动、分类鉴定 微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种 含化学成分不明确的天然物质 工业生产 培养基成分明确 分类、鉴定 在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长 培养、分离出特定微生物 在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物 鉴别不同种类微生物 选择培养基 液体培养基 半固体培养基 固体培养基 液体培养基： 表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长 back 半固体培养基： (是否运动) 无动力 有动力(弥散) 固体培养基：菌落 分离酵母菌、霉菌等真菌 （抑制细菌、放线菌的生长） 分离金黄色葡萄球菌 分离固氮菌 分离自养型微生物 　　伊红—美蓝培养基是鉴别培养基，可以用来检测自来水中的大肠杆菌是否超标，因为的代谢产物与伊红—美蓝结合，使菌落呈黑色并带有金属光泽，使大肠杆菌的菌落显示出来，并没有促进大肠杆菌的生长和抑制其他微生物的生长。 鉴别培养基 大肠杆菌呈黑色中心 ,有或无金属光泽 微生物举例 基本碳源 氢的供体 能源 营养类型 代谢类型 光能无机营养(光能自养型) 光能有机营养(光能异养型) 化能无机营养(化能自养型) 化能有机营养(化能异养型) 光 光 无机物 有机物 无机物 有机物 无机物 有机物 二氧化碳 二氧化碳及简单有机物 二氧化碳 有机物 大多数已知细菌和全部真核微生物 硝化细菌 氢细菌 紫色非硫细菌 蓝细菌 绿色硫细菌 藻类 19世纪中期，关系到法国经济命脉的酿造业曾一 度遭受毁灭性的打击。在生产过程中， 出现了葡萄酒变酸、变味的怪事。经过一番研究，法国科学家巴斯德发现导致生产失败的根源在于发酵物中混入了杂菌。 由此人们意识到保持培养物纯净的重要性。 防止杂菌入侵，获得纯净的培养物， 是研究和应用微生物的前提。一方面需要为培养的微生物提供合适的营养和环境条件，另一方面需要确保无处不在的其他微生物无法混入。 专题2 :微生物的培养与应用 ㈠.微生物的类群 微生物 原核类: 真核类 非细胞类： 细菌、支原体、放线菌、蓝藻 个体微小、结构简单 酵母菌、霉菌、食用菌 真菌： 原生生物： 显微藻类、原生动物（如：草履虫、变形虫等） 病毒、类病毒、朊病毒 ◆微生物的共同特点： 微生物基础知识 一、基础知识： （一）培养基