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- 2018-08-31 发布于江苏
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大规模细胞培及发酵技术
铵 细胞培养和发酵中铵的来源: 主要来源: 代谢谷氨酰胺(谷氨酰胺降解) 谷氨酰胺降解成铵和吡咯烷酮酸 其他氨基酸的脱氨基作用 铵的水平也取决于细胞密度和细胞代谢方式. 引起细胞抑制的铵离子浓度范围: 从: 0.5 mM (L Mouse Cells) 到: 40.0 mM (M. Ascites Tumor Cells)(不同的细胞株对铵有不同的耐受度) 铵 pH 会受 NH3增加的影响: NH4+ NH3 + H + 铵的增加也会改变细胞内蛋白质的运动.监控发酵罐和生物反应器中铵的水平(废物). 推算谷胺酰胺的降解水平. 考察铵浓度对细胞密度和产物浓度的影响. 监控引入培养基的质量. 限制铵抑制的策略 增加换液的速率 (补料). 维持培养液中低的谷氨酰铵浓度减少其转化和降解. 在低的 pH培养减少NH3形成. 去除培养液中的铵: 酶转化 通过特殊的 “PTFE” 膜将 NH3 扩散到低pH 溶液中 使用能够逐步接受高 NH3 浓度的细胞 谷氨酰胺 与葡萄糖一样, 谷氨酰胺也是细胞的主要物质: * 碳和氮 * 能量 谷氨酰胺通常被认为是细胞培养的主要限制营养 谷氨酰胺是生物合成的前体物质: * 嘌呤 * 嘌呤核苷 谷氨酰胺是合成嘧啶,氨基糖和天冬的主要氨基受体 谷氨酰胺 监控谷氨酰胺的水平: 确保细胞生长所需的能量. 开
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