高中生物选修专题一基因工程综述.pptVIP

基因工程专题复习 什么叫平末端？ 限制性内切酶 特点：特异性，即识别特定核苷酸序列，在特定的切点切割。 举例：大肠杆菌的一种限制酶（EcoRⅠ)能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开形成黏性末端，SmaⅠ能识别CCCGGG序列，并在C和G之间切割形成平末端 。 3、分子运输车—运载体 1.作用： 2、载体的种类 1、质粒：是一种裸露、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，具有自我复制能力的双链环状DNA分子； 2、λ噬菌体的衍生物； 3、动植物病毒等。 1.目的： 二. 基因表达载体的构建——核心 IMN 2.组成： ①使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给子代。 ②同时使目的基因能表达和发挥作用。 (3)终止子 (4)标记基因 (2)启动子 (1)目的基因 不同受体细胞，目的基因导入受体细胞的方法不同，基因表达载体的构建有所差异。 质粒 DNA分子 限制酶处理 一个切口 两个黏性末端 两个切口 获得目的基因 DNA连接酶 重组DNA分子（重组质粒） 同一种 基因表达载体的构建 * 三、将目的基因导入受体细胞 1.转化： 目的基因进入受体细胞内，并且在受体 细胞内维持稳定和表达的工程 2.常见转化方法： ①农杆菌转化法：双子叶植物和裸子植物。 （1）将目的基因导入植物细胞 ③基因枪法：单子叶植物。 ②花粉管通道法 （3）将目的基因导入微生物细胞— 感受态细胞法。 （2）将目的基因导入动物细胞——显微注射法。 ①特点: 农杆菌转化法： （1）将目的基因导入植物细胞 能感染双子叶植物和祼子植物,对大多数单子叶植物没有感染能力 ②过程： Ti质粒的T—DNA可转移至受体细胞并整合到其染色体上 ③适用生物： 双子叶植物、祼子植物。 基因枪法： 利用压缩气体产生的动力 ，将包裹在金属粒表面的表达载体DNA打入受体细胞中，使目的基因与其整合并表达的方法 ①操作方法： ②金属粒： 将目的基因导入单子叶植物细胞 钨粉粒子和金粉粒子，粒子的直径一般在0.6～4um 。 ③适用：单子叶植物 旧式的基因枪靠火药为动力，将子弹头上粘的ＤＮＡ打出。其原理和声音都与鸟枪相仿，成功率仅为千分之八。小图为子弹 新式的基因枪靠高压氦气为动力，将微粒载片上的ＤＮＡ送出，成功率在１５％左右。小图为微粒载片和阻挡网。 手提式基因抢 花粉管通道法： 将目的基因导入植物细胞 ①操作方法： ②特点： 在植物花受粉后，花粉形成花粉管还末愈合前期，剪去柱头，然后，滴入DNA（含目的基因）使目的基因借助花粉管通道进入受体细胞 十分简便经济 ③例： 转基因抗虫棉 * 近五年，基因工程只要考点： 1、基因工程的工具；限制酶，DNA连接酶，运载体单独考察比较少。 2、基因工程的操作步骤中，目的基因的获取年年考。重点考察“从基因文库与CDNA文库的构建过程及区别”另外，“基因表达载体的构建”也是考察的重点。经常与限制酶、DNA连接酶一起考察，涉及启动子、终止子、标记基因等。 3、导入受体细胞的考察较简单，2010与2013年主要集中在导入动物和植物细 胞中。 4、目的基因的检测与鉴定是重点考察内容，每年都有涉及，分子水平和个体水平都考察，重点理解分子杂交；蛋白质工程考察较少。 什么叫基因工程？ 基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术。该技术是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物。 （一）基因工程的概念 结果 基本过程 操作水平 操作对象 操作环境 基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 人类需要的基因产物 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 （二）DNA重组技术的基本工具 分子手术刀—限制性内切酶 分子缝合针—DNA连接酶 分子运输车—运载体 识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 主要是从原核生物中分离纯化出来的一种酶。能将外来的DNA切断，由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性内切酶。 4000种。 1、来源： 2、种类： 3、作用： 4、结果： 形成两种末端 一、 “分子手术刀” ——限制性核酸内切酶 粘性末端 平末端 什么叫黏性末端？ 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样