GB/T 13267-1991水质　物质对淡水鱼(斑马鱼)急性毒性测定方法.pdf

中华人民共和国国家标准 水质 物质对淡水鱼(斑马鱼) 急性毒性测定方法 GB/T 13267一91 Waterqnet训y一加加rsn枷址扬.成the acutetoxicityofsubstancetoafreshwaterfish (BrachydaniorerioHamilton-Buchanan) 本标准参照采用国际标准ISO73463-3f(水质— 物质对淡水鱼(斑马鱼 Iirachydanio二。o)急性 致死毒性的测定)}, 本标准可根据被测物质的性质确定采用静水式、换水式或流水式试验。 推荐采用斑马鱼井不排除使用其他鱼种，但对试验条件需做相应的改变,例如稀释水性质及温度。 除斑马鱼(Brachydaniorerio)外，在不改变本标准的试验条件下，青娥鱼(Oryziaslatipes)(真骨鱼 总目 青娜科)亦可供使用。 本标准使用重铬酸钾(K,Cr,4,)为参考毒物。在24h试验期间重铭酸钾的LC50值必须处于20。一 400mg/L之间。 飞主题内容与适用范阻 本标准规定了在确定的试验条件下测定水溶性物质引起斑马鱼急性致死毒性大致范围的方法— 静水法、换水法和流水法口 本标准适用于水中单一化学物质的毒性测定。工业废水的毒性测定也可使用此方法。(废水样品的 采集、保存、干扰的处理见附录A,) 2 原理 在确定的试验条件下用斑马鱼为试验生物测定毒物在48h或96h后引起受试斑马鱼群体中5。% 鱼致死的浓度。这个浓度以24h,48h,72h或96hLC50表示。 3 定义 3,1静水式试验 试验期间不需更换试验液，限于研究那些化学性质比较稳定的物质。 32 换水式试验 每24h或更短的时间内更新一次试验液。可用于试验这类物质。它们的浓度在更换试验液的时间 内相对稳定(亦即波动在初始值的20Y,之内)。 3.3 流水式试验 试验液连续更新;可用于大多数物质，包括水中不稳定的物质。 Q试验生物和试验溶液的制备 4.1 试验生物 国家环境保护局，991-09一14批准 1992一08一01实施 GB/r13267一91 试验鱼种应是斑马担尼鱼(真骨鱼总目，鲤科)(BrachydaniorerioHamilton-Buchanan(Teleostei Cyprinidae)3。试验鱼体长3015mm，体重。.3士。.1g,选自同一驯养池中规格大小一致的幼鱼。试验 前该鱼群应在与试验时相同的环境条件下，在连续曝气的水中至少驯养两周。试验前24h停止喂饲，每 天清除粪便及食物残渣。驯养期间死亡率不得超过1o/0n，如果超过10%，则该批鱼不得用作试验 试验鱼应无明显的疾病和肉眼可见的畸形。试验前两周内不应对其做疾病处理。斑马鱼驯养、繁殖 的环境参数见附录B 4.2 标准稀释水 新配制的标准稀释水pH为7.8士。.2，硬度为250mg/L左右(以CaCO。计)，用蒸馏水或去离子水 由下面4种溶液制备。 a. 氯化钙溶液 将11.76g氯化钙(CaCl,，2H,O)溶于水中并稀释至1L. b.硫酸镁溶液 将4.93g硫酸镁(MgSO,·7H}O)溶于水中并稀释至1L, c.碳酸氢钠溶液 将2.59g碳酸氢钠(NaHCO,)溶于水中并稀释至1L, d 氯化钾溶液 将0.23g氯化钾(KCl)溶于水中并稀释至1L, 将以上四种溶液各取25mL加以混合并用蒸馏水稀释至1L。将制备好的稀释水曝气至溶解氧浓 度达到空气饱和值(ASV)，并将pH稳定在7.8士。2。如果需要，用氢氧化钠溶液或盐酸调节pH，这样 制备的稀释水试验前不需强制曝气。 4.3 制备试验物质储备液 配制试验物质储备液所用试剂至少为分析纯。将已知量的试验物质溶于一定体积稀释水、去离子水 或蒸馏水中。储备液应当天配制。对于化学性质较稳定的物质，可配制供两天以上使用的溶液，配好后 低温保存。溶解低溶解度的物质时，可使用超声波装置，也可加入对鱼低毒的有机溶剂。