丁酸梭菌和鼠李糖乳杆菌体外混合培养对肠道致病菌的影响.docVIP

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丁酸梭菌与鼠李糖乳杆菌体外混合培养对肠道致病菌的影响 [摘要] 本试验研究了丁酸梭菌与鼠李糖乳杆菌混合培养对肠道中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌 、产气荚膜梭菌和大肠杆菌4种致病菌的影响。结果表明:丁酸梭菌对这4种菌均有明显的抑制作用,可使其菌落数下降3~5个数量级;鼠李糖乳杆菌可降低产气荚膜梭菌、沙门氏菌菌落数;丁酸梭菌与鼠李糖乳杆菌混合培养可使4种致病菌菌落数均下降3~4个数量级。 由此可见,两种菌混合培养对 4 种病原微生物的抑制无协同作用。 [关键词] 丁酸梭菌;鼠李糖乳杆菌;混合培养;肠道致病菌 [Abstract] This experiment was conducted to study the effects of the mixed culture of Clostridium butyricum and Lac- tobacillus rhamnosus on intestinal pathogens,including Salmonella gallinarum,Staphylococcus aureus,Clostridium perfrin- gens and Escherichia coli.The results showed that:the Clostridium butyricum significantly inhibited the number of these four types of bacteria and made them down 3 ~ 5 orders of magnitude;Lactobacillus rhamnosus reduced Clostridium per- fringens,Salmonella gallinarum colonies;the mixed culture of Clostridium butyricum and Lactobacillus rhamnosus made four kinds of bacteria down 3 ~ 4 orders of magnitude.The results indicated that the mixed culture of strains had no syner- gistic inhibition effect on the four kinds of pathogenic microorganisms. [Key words] Clostridium butyricum;Lactobacillus rhamnosus;mixed culture;enteric pathogens 丁酸梭菌属于梭菌属, 是一种专性厌氧的革 兰氏阳性芽孢杆菌,其广泛分布于土壤,也能从 健康动物的肠道中分离出来。 丁酸梭菌适合动物 的肠道厌氧环境(呼慧娟等,2011),可以控制消 化道紊乱(张晓阳等,2012),有效抑制有害菌(曹 广添等,2012)。 鼠李糖乳杆菌属于乳杆菌,具有 较强的酸及胆碱耐受能力 (王玉华等,2008),有 抑制有害菌的作用 (吴光伟和韩建春,2009),具 有抗氧化活性,并且可以影响机体免疫功能。 目 前丁酸梭菌与鼠李糖乳杆菌均被广泛用作饲料 添加剂,本试验研究了丁酸梭菌与鼠李糖乳杆菌 联合培养对产气荚膜梭菌、 金黄色葡萄球菌、沙 门氏菌、大肠杆菌的抑制作用,为微生物制剂联 和使用提供理论依据。 1 材料与方法 1.1 试验材料 1.1.1 菌种、试剂及培养基 丁酸梭菌(Clostridi- um butyricum,HJCB998),由浙江惠嘉生物科技有 限公司提供;鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamno- sus,ATCC7469)、 产气荚膜梭菌 (Clostridi um per- fringens,ATCC13124), 均由广东省微生物菌种保 藏中心提供; 大肠杆菌 C83928 (Escherichia coli C83928)、沙门氏菌 (Salmonella gallinarum,C79)、 金 黄 色 葡 萄 球 菌 (Staphylococcus aureaus, SHZ018), 均由浙江大学动物科学学院研究室提 供。 琼脂、氯化钠为分析纯。 厌氧液体培养基、LB 液体培养基、LB 琼脂培养基、 强化梭菌培养基 (RCM)、DRCA 梭菌选择性培养基、 伊红美蓝培养 基(EMB)、 乳酸细菌培养基 (MRS)、BP 培养基、 HE 培养基、SC 培养基,均购自北京陆桥生物科技 有限公司。 1.1.2 主要仪器与设备 厌氧培养箱、灭菌锅、恒 温培养箱、培养皿、超净工作台、试管、接种环等。 1.2 试验方法 1.2.1 菌种活化 丁酸梭菌活化:

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