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丁酸梭菌与鼠李糖乳杆菌体外混合培养对肠道致病菌的影响
[摘要] 本试验研究了丁酸梭菌与鼠李糖乳杆菌混合培养对肠道中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌 、产气荚膜梭菌和大肠杆菌4种致病菌的影响。结果表明:丁酸梭菌对这4种菌均有明显的抑制作用,可使其菌落数下降3~5个数量级;鼠李糖乳杆菌可降低产气荚膜梭菌、沙门氏菌菌落数;丁酸梭菌与鼠李糖乳杆菌混合培养可使4种致病菌菌落数均下降3~4个数量级。 由此可见,两种菌混合培养对 4 种病原微生物的抑制无协同作用。
[关键词] 丁酸梭菌;鼠李糖乳杆菌;混合培养;肠道致病菌
[Abstract] This experiment was conducted to study the effects of the mixed culture of Clostridium butyricum and Lac-
tobacillus rhamnosus on intestinal pathogens,including Salmonella gallinarum,Staphylococcus aureus,Clostridium perfrin-
gens and Escherichia coli.The results showed that:the Clostridium butyricum significantly inhibited the number of these
four types of bacteria and made them down 3 ~ 5 orders of magnitude;Lactobacillus rhamnosus reduced Clostridium per-
fringens,Salmonella gallinarum colonies;the mixed culture of Clostridium butyricum and Lactobacillus rhamnosus made
four kinds of bacteria down 3 ~ 4 orders of magnitude.The results indicated that the mixed culture of strains had no syner-
gistic inhibition effect on the four kinds of pathogenic microorganisms.
[Key words] Clostridium butyricum;Lactobacillus rhamnosus;mixed culture;enteric pathogens
丁酸梭菌属于梭菌属, 是一种专性厌氧的革
兰氏阳性芽孢杆菌,其广泛分布于土壤,也能从
健康动物的肠道中分离出来。 丁酸梭菌适合动物
的肠道厌氧环境(呼慧娟等,2011),可以控制消
化道紊乱(张晓阳等,2012),有效抑制有害菌(曹
广添等,2012)。 鼠李糖乳杆菌属于乳杆菌,具有
较强的酸及胆碱耐受能力 (王玉华等,2008),有
抑制有害菌的作用 (吴光伟和韩建春,2009),具
有抗氧化活性,并且可以影响机体免疫功能。 目
前丁酸梭菌与鼠李糖乳杆菌均被广泛用作饲料
添加剂,本试验研究了丁酸梭菌与鼠李糖乳杆菌
联合培养对产气荚膜梭菌、 金黄色葡萄球菌、沙
门氏菌、大肠杆菌的抑制作用,为微生物制剂联
和使用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 菌种、试剂及培养基 丁酸梭菌(Clostridi-
um butyricum,HJCB998),由浙江惠嘉生物科技有
限公司提供;鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamno-
sus,ATCC7469)、 产气荚膜梭菌 (Clostridi um per-
fringens,ATCC13124), 均由广东省微生物菌种保
藏中心提供; 大肠杆菌 C83928 (Escherichia coli
C83928)、沙门氏菌 (Salmonella gallinarum,C79)、
金 黄 色 葡 萄 球 菌 (Staphylococcus aureaus,
SHZ018), 均由浙江大学动物科学学院研究室提
供。 琼脂、氯化钠为分析纯。 厌氧液体培养基、LB
液体培养基、LB 琼脂培养基、 强化梭菌培养基
(RCM)、DRCA 梭菌选择性培养基、 伊红美蓝培养
基(EMB)、 乳酸细菌培养基 (MRS)、BP 培养基、
HE 培养基、SC 培养基,均购自北京陆桥生物科技
有限公司。
1.1.2 主要仪器与设备 厌氧培养箱、灭菌锅、恒
温培养箱、培养皿、超净工作台、试管、接种环等。
1.2 试验方法
1.2.1 菌种活化 丁酸梭菌活化:
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