肿瘤基因突变检测(详细).pdf

肿瘤基因突变检测 癌症是一类难以预防的疾病，中晚期癌症治愈的可能性又很小，而早期癌症的治愈率可 达 65% 以上，有些肿瘤可达90% 以上，因此，战胜癌症的关键是早期发现癌症。由于癌症 早期常无特殊症状，甚至毫无症状，故癌症的早期发现、早期诊断主要是通过定期健康体检 和人群筛查完成。目前筛查癌症的方法主要是通过化验血肿瘤指标及 B 超、CT、MRI 、PET-CT 等检查，但这些方法的敏感性和特异性均不高，发现有异常时往往已是中晚期。 研究表明，癌症是环境因素与细胞遗传物质相互作用的结果，是多因素、多阶段与多 基因作用的结果，是基因突变累积的结果，因此癌症是基因病。在人类众多的基因中，原 癌基因和抑癌基因与癌症的发生发展密切相关。原癌基因和或抑癌基因的突变可引起细胞 癌变。癌症在形成实性肿块以前，与癌症相关的基因突变的过程已经发生，而且这个过程可 能已长达十余年、甚至更长时间。在这期间，癌细胞还没有形成明显的肿块，但已有微量肿 瘤 DNA 释放到循环血液中。通过高通量基因测序技术检测循环血液中这些基因的突变，可 以筛查早期或超早期癌症，评估放化疗的疗效，预测靶向药物的疗效，监测术后早期复发 等；对肿瘤组织进行基因突变检测，有助于了解肿瘤的产生、发展过程，判断肿瘤的类型 和预后；有助于预测原癌基因相关抗肿瘤药物的疗效。基因突变常表现为杂合突变、缺失 或插入突变等，突变检测对测序的质量要求很高。通过应用基因分析仪进行突变分析，可 准确判断出杂合、缺失、插入突变等各种突变类型，结果准确客观。 17 种常见高发肿瘤，包括乳腺癌（breast cancer ）、结肠癌（colorectalcancer ）、子宫癌 （endometrial cancer ）、脑胶质瘤（glioma ）、白血病（leukemia ）、肺癌（lungcancer ）、淋巴 癌（lymphoma ）、成神经管细胞瘤（medulloblastoma ）、黑色素癌(melanoma)、间皮瘤 (mesothelioma) 、多性骨髓瘤(multiple myeloma) 、卵巢癌(ovarian cancer)、胰腺癌(pancreatic cancer) 、真性红细胞增多(polycythemia vera) 、前列腺癌(prostatecancer) 、肾细胞癌(renal cell cancer)和恶性内瘤(sarcoma)，其发病机制涉及与多种肿瘤发生共同相关的肿瘤易感基因群介 导的分子改变，参与了肿瘤发生的早期分子事件。系统寻找和探讨它们在肿瘤发生发展过 程中的遗传学变异，对阐明肿瘤早期发生机制及寻找肿瘤早期预警、早期诊断和早期治疗 的分子靶标都具有重要的现实意义。利用高通量分子测序技术平台，可同时开展多个肿瘤 基因突变检测项目，如 EGFR 、K-RAS 、N-RAS 、B-RAF 、PI3K 、p53 、p16 、BRCA1 、 BRCA2 等。 基因的突变检测应用：⑴ 了解肿瘤的发病机制；⑵ 预测原癌基因相关药物疗效；⑶ 了解肿瘤的恶性化程度，预测肿瘤发展；⑷ 细胞株稳定性筛选。 K-RAS 基因(K-ras,p21)突变检测 KRAS基因（K-ras,p21 ）检测是目前医生了解大肠癌患者癌基因状况最直接、最有效的 方法，通过检测不仅可以深入了解癌基因的情况，更重要的是筛选出针对抗表皮生长因子受 体靶向药物治疗有效的大肠癌患者，帮助医生选择对肿瘤病人最有效的治疗方法。 RAS 基因家族与人类肿瘤相关的基因有三种——HRAS 、KRAS 和 NRAS ，分别定位在 11、12 和 1 号染色体上。在 RAS 基因中，KRAS 对人类癌症影响最大，正常时，它能控制 调控细胞生长的路径；发生异常时，则导致细胞持续生长，并阻止细胞自我毁灭，不能产 生正常 RAS 蛋白，使细胞内信号传导紊乱，细胞增殖失控而癌变。 原癌基因（K-ras ）突变发生于多种癌症，例如结肠癌、肺癌、甲状腺癌、胰腺癌、胆 管癌。 K-RAS 基因是所有肿瘤中突变频率最高的致癌基因, 约有 10%-20%的肿瘤与 K-RAS 的异常激活有关，参与EGFR 信号传导通路。结直肠癌患者中 K-RAS 基因的突变率 约为 35-40%, 而且 90%的突变发生在 12、13 位密码子，可导致 p21-ras 蛋白的生长信号的异 常变化。该基因是 TKI 治疗的靶分子，携带有 K-RAS 基因突变的患者对