正向间接血凝试验教案.pptVIP

正向间接血凝试验 省疫控中心 周迎春 主要内容 背景 原理 实验器材的优化 试剂的优化 样品的优化 实验过程优化 判定标准 注意问题 一、背景 正向间接血凝试验(IHA)是上世纪 60 年代在我国发展起来的血清学诊断技术，是一种用已知抗原检测未知抗体的试验方法，它的操作方法相对简单，实验原理也易于理解，在基层实验条件和技术相对落后的情况下经常被应用到，在一些动物疫病的免疫抗体检测、疫病诊断上具有现实意义。 林琳等研究表明应用猪瘟正向间接血凝法(IHA)与斑点酶联免疫吸附试验（dot- ELISA）以及猪瘟抗体免凝金标试纸条比较，对规模化养猪场 138份不同阶段猪血清进行检测，三种方法检测抗体的阳性率结果接近。 一、背景 数十年来正向间接血凝试验技术不断完善，它具有简单、经济、快速、实用的特点，在我国有很大的用户群，近年来，兰州兽医研究所生产的液体猪瘟和口蹄疫正向间接血凝试验的试剂用量在逐年加大。然而，正向间接血凝作为一种微量的定量反应试验，实验结果受操作技术影响较大，任何操作环节的纰漏都会使最后判定的结果与正确结论大相径庭。 为规范操作，本次培训就实验中器材、试剂、样品、过程和判定标准等方面的优化做一综述，以期作为此实验的借鉴。 二、原理 正向间接血凝试验的原理是将可溶性抗原吸附于与免疫无关的载体（红细胞）表面，此吸附抗原的红细胞与相应的抗体结合，在有电解质存在的适宜条件下发生