猪链球菌检测-课程.ppt

人感染猪链球菌病是由猪链球菌（streptococcus suis）感染人而引起的人畜共患性疾病。从事猪的屠宰及加工等人员为高危人群，本病主要通过皮肤的伤口而感染。临床表现为发热、寒战、头痛、食欲下降等一般细菌感染症状，重症患者可合并中毒性休克综合征（toxic shock syndrome, TSS）和链球菌脑膜炎综合征（streptococcus meningitis syndrome, SMS）。 1968年丹麦学者首次报道了3例人感染猪链球菌导致脑膜炎并发败血症病例，1975年荷兰也出现了散发病例的报道。此后，中国香港、英国、加拿大、德国、法国、美国、澳大利亚、比利时、巴西、西班牙、日本、泰国、瑞典及中国内地陆续有人感染猪链球菌病的报道。截至2000年，全球已报道了200多例人感染猪链球菌病病例，报道病例较多的国家或地区普遍养殖业发达或有食用猪肉的习惯，病例呈高度散发态势。在我国，1998年江苏省报告了人感染猪链球菌病，发病25例，死亡14例；2005年6月至8月，四川省发生的人感染猪链球菌病爆发疫情，为国内外迄今为止见于报道的最大规模人感染猪链球菌病疫情，发病数204例，死亡38例。 链球菌分类： 1、根据溶血现象分类 1）甲型溶血性链球菌：称甲型溶血或?溶血，?溶血环中的红细胞并未完全溶解。多为条件致病菌。 2）乙型溶血性链球菌：称乙型溶血或?溶血，?溶血环中的红细胞完全溶解，致病力强。 3）丙型链球菌：无溶血环，一般不致病。 猪链球菌α溶血(偶而也有弱β溶血或α溶血、β溶血现象均不明显 ) ，某些菌株在马血培养基上β溶血。 链球菌分类： 根据抗原结构的分类 兰氏分类：按多糖类抗原（C抗原）将链球菌分成A、B、C、D、E、F、G、H、K、L、M、N、O、P、Q、R、S和T群(其中缺I、J群) ，近年又增加U、V群，共20群，每个群有1个或多个种。 一、病原学 猪链球菌属链球菌（streptococcus）科，革兰染色阳性，呈球形或卵圆形。链球菌科有30个以上的菌属，分类有数种方法，根据链球菌兰斯菲尔德（Lancefield）分类法，将猪链球菌分到了R、S、T群。近年根据细菌荚膜多糖抗原的差异，将猪链球菌分为35个血清型，即1～34型和1/2型，其中1/2型为同时含有1型和2型抗原的菌株。2型猪链球菌主要是R群，而1型猪链球菌主要是S群。 迄今为止，文献报道感染人的猪链球菌分别是2型、1型和14型，尤以2型为常见，也是最常被分离到的猪链球菌型别，其他两个型别仅有个案报道。 1、猪链球菌的理化特性 该菌无芽胞，有荚膜，在血平板上生长呈细小菌落，无色，半透明，直径0.5～1 mm，边缘整齐，凸起，光滑。根据溶血情况分类，猪链球菌在羊血平皿上表现为α溶血， 而在马血平皿上表现为β溶血。适宜的培养基为血培养瓶及血平皿，培养温度36 ℃、时间18～20小时。新分离的猪链球菌，形态较典型，链长可达20多个菌体；二代培养后细菌形态不典型,甚至变为革兰阴性球杆菌,不成链。因此在诊断、研究时，对刚分离到的细菌形态进行观察十分重要。猪链球菌对环境理化因素的抵抗力差，对常见消毒剂都敏感。 2、毒力因子 目前认为，较为重要的猪链球菌毒力因子主要有：1）荚膜多糖（CPS）：是目前惟一被确认的，也是最为重要的毒力因子。2）溶菌酶释放相关蛋白（muramidase-released protein, MRP）和细胞外蛋白因子（extracellular factor, EF）：除荚膜多糖外，这两种蛋白是最常用于评价猪链球菌毒力的指标。 3）猪链球菌溶血素（suilysin）：溶血素被认为是几种细菌的主要毒力因子，可能在猪链球菌侵入和裂解细胞的过程中发挥着重要作用。 4）44000蛋白、IgG结合蛋白及其他因素：44000蛋白为2型猪链球菌的胞壁蛋白，IgG结合蛋白属热休克蛋白，有报道认为也与毒力相关。菌毛(fimbriae)、黏附因子(adhesions)也是一些细菌常见的毒力因子。 3、MLST分析 对我国江苏和四川省人感染猪链球菌病爆发期间分离到的菌株，进行多位点序列分型（multilocus sequence typing ,MLST），证实均为序列7型（MLST 7型）。 二、发病机制 猪链球菌感染的主要传播途径是经伤口的直接接触感染。猪链球菌经皮肤或黏膜的伤口进入人体，进入血液循环后在血液中迅速生长和繁殖，即败血症，细菌随血液循环进入人体的各器官、组织，致多器官、组织发生病变。细菌并释放毒素，致机体发生严重的中毒反应，即毒血症。重症感染及细菌毒素的作用，致血管内皮损伤，以及血液处于高凝状态，并发弥散性血管内凝血(disseminated intravascular coagulation