发酵工程制药实验-链霉菌发酵摘要.docVIP

实验2灰色链霉菌的活化 一、实验目的 一、实验目的 学习制备高氏一号斜面培养基的方法以及斜面接种技术。 二、实验原理 二、实验原理 高氏一号斜面培养基是一种合成培养基，用于培养放线菌。 三、实验试剂与仪器 三、实验试剂与仪器 1. 菌种：灰色链霉菌； 2. 培养基：可溶性淀粉20g，硝酸钾1 g，氯化钠0.5 g，磷酸氢二钾0.5 g，硫酸镁0.5 g，硫酸亚铁0.01 g，琼脂20 g，水1000毫升，PH7.2—7.4（配制时注意，可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中）； 3. 器材：天平、500mL刻度量杯、小刀、牛角匙、玻棒、纱布、18mL×180mL试管、棉花、电炉、烧杯、记号笔、酒精灯、接种环等。 四、实验步骤 四、实验步骤 1. 高氏一号培养基的制备 （1）按配方称量药品，加热搅拌至琼脂完全熔化，补水至1000mL。趁热分装于18mL×180mL试管，斜面以8mL为宜。 （3）分装完毕后，塞好棉塞并将试管捆扎好。高压蒸汽灭菌：121℃灭菌20min，灭菌后趁热摆斜面。 2. 斜面接种 接种是将纯种微生物，在无菌操作条件下，移植到已灭菌并适宜该菌生长繁殖所需要的培养基中。为了获得微生物的纯种培养，要求接种过程中必须严格进行无菌操作。一般是在无菌室内，超净工作台或实验台酒精灯火焰旁进行。 （1）左手拿试管菌种，右手拿接种环，先将金属环烧灼灭菌，再将接种环在空白