沙门氏菌内标PCR快速检测试剂盒的研制与应用-中国农业科学.PDF

中国农业科学 2011,44(16):3395-3402 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.16.012 沙门氏菌内标PCR 快速检测试剂盒的研制与应用 李小玲，刘 斌，但现龙，王大鹏，周 敏，史贤明 （上海交通大学农业与生物学院/ 中美食品安全联合研究中心/ 陆伯勋食品安全研究中心，上海200240 ） 摘要：【目的】研制一种能有效指示假阴性的PCR 检测产品，用于沙门氏菌快速、准确、灵敏的检测。【方法】 针对沙门氏菌invA 基因、stn 基因序列分别设计引物与扩增内标，建立添加扩增内标的沙门氏菌PCR 检测方法， 组装试剂盒，并对试剂盒的各项性能进行评价。【结果】试剂盒对147 株沙门氏菌和28 株非沙门氏菌的检测结果 显示，所有沙门氏菌均能扩增出362 bp 的目标条带，非沙门氏菌仅扩增出520 bp 的内标条带。试剂盒检测沙门 氏菌基因组DNA 的检测限为8.0 fg/PCR，检测染菌量为