自孰硅化孳.PDFVIP

维普资讯 第27卷 一第4期 贵 州 I 业 大 学 学 报 Vo1．27No．4 l 年 8月 JOURNALOFGUIZHOUUNIVERSITYOFTECHNOLOGY August．1998 ． 水含量对C．cylindracea脂肪酶催化有机 7l厂 6 硅化合物生物转化的影响 0 。』 (贵州工业荸邱甭五树毅 阳：550oo3) 姚汝华宗敏华oGzT,t／ (华南理jj 蕊 程系，广州：510641) 摘 要 研究1水含量对有机溶剂中脂肪酶催化有机硅化合 _的生特转化的影响。 水含量可影响酶生物转化反应的反应速度，化学反应平衡及化学反应最适温度，在正 已烷有机溶剂中酶催化有机硅醇酯化反应的最适水含量为0．06(w／w) 。 关键词堂 ；有机硅醇；堕堕生 中国图书资料分类号 ：TQ920．1；TQgZ5．6 自孰硅化孳 引 ．言 噜化 依 有机相酶催化反应中，水参与维持酶蛋自质的水化作用，与酶的催化括性构型的维持力如 氢键、疏水键、离子作用、范簿华力等因素有关。此外，当水作为反应产物之一时，水还对有机相 酶催化反应的化学平衡、反应速度、产物生成等因素有影响。显然水份的作用是十分重要的。实 验研究了C．cylindracea脂肪酶催化有机溶剂中有机硅醇与脂肪酸、脂肪酸酯生化反应时水份 的影响。 1 材料与方法 1．1 材料 脂肪酶L一1754，来源于C．cylindracea，活力为4570单位 ／毫米克蛋白质(Biuret法)，购 自SIGMA公司。(士)一1一三甲基硅一1一乙醇，1一三甲基硅一2一乙醇，购 自Aldrich公司。 (士)一1一三 甲基硅一1一丙醇，(士)--1一三 甲基硅一2一丙醇，日本京都太学田中教授赠送。 其它药品均为市售。 1．2 仪器 Gc一14B气相色谱仪配 c—R7A色谱数据处理机，日本岛津公司。 cPB一2o极性毛细管柱，相当于PRG一20M，最高使用温度250X3，柱内径0．2mill，柱长 25m，薄膜厚度0．25～O．5 m，日本岛津公司。 美国产真空冷冻干燥机。 深圳产水浴控温振荡器 1．3 方法 1．3．1 脂肪酶粉的干燥 · 国家 自蒋科学基金和广东省自然科学基金赞助项 目 l997一l2—29收稿 ，l998—03一O2改回 ￡玉 维普资讯 92 贵 州 I 业 大 学 学 报 1998年 用真空冷冻干燥机干燥 。 1．3．2 有机溶剂脱水及水饱和 用 3A分子筛和无水氯化钙吸附除去有机溶剂中的水份得脱水有机溶剂 将有机溶剂与 水置密闭容器 中平衡 48小时得水饱和有机溶剂。 1．3．3 脂肪酶催化醋化和转醅反应 ∞ ∞ ∞ ∞ {弓 帕 在50m1带塞三角瓶中，加入 lOml有机溶剂，10mM 硅醇底物和 10mM 脂肪酸(酯)底 物， 正十五烷作内标，加入C。cylindracea脂肪酶5Omg，在30C、120rpm条件下保温振荡 反应，一定时间间隔吸取 i00tal样品用气相色谱分析有机硅醇底物的减少，计算转化率 1