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大马士革玫瑰嫩茎组培快繁技术的研究 　　摘要：以“大马士革”玫瑰当年生枝条为外植体，研究了不同枝条部位、取材时期、无机盐浓度、激素浓度组合对腋芽萌发、不定芽增殖及生根的影响。结果表明：“大马士革”玫瑰当年生枝条的中部茎段腋芽萌发率较高，且以11月份采集的腋芽萌芽率较好；MS培养基适于玫瑰枝条腋芽的萌发；外源激素NAA和6-BA在促进腋芽萌发中起重要作用，最佳组合为MS+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA，诱导率达97.5%；继代培养中，最佳增殖培养基为MS+005 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA，增殖系数为4.2；最佳生根培养基为MS+0.05 mg/L NAA，生根率为43.3%。 　　关键词：玫瑰；组织培养；增殖；腋芽 　　中图分类号： S685.120.4+3文献标志码： A文章编号：1002-1302（2016）06-0081-03 　　收稿日期：2016-01-15 　　基金项目：新疆生产建设兵团科技支疆项目（编号：2014AB010、2011AB007）；新疆生产建设兵团科技攻关项目（编号：2011BA005）。 　　作者简介：李敏（1971―），女，四川仁寿人，高级农艺师，从事特色作物育种及栽培技术研究工作。E-mail：lm6389@126.com。 　　通信作者：张晨光，副研究员，从事特色作物育种及栽培技术研究。玫瑰（Rose rugosa Thunb.）是蔷薇科（Rosaceae）蔷薇属直立落叶丛生灌木[1]，其花色艳丽、花形优美、香气浓郁、含油量高，是一种重要的特产经济植物，具有很高的经济和观赏应用价值。此外，玫瑰花蕾香嫩、润泽，具有理气解郁之功效，也是一种重要的茶饮及中药材[2-3]。随着社会的进步及生活水平的提高，玫瑰的市场需求日益增加，高产成为玫瑰生产者追逐的主要目标之一。常规玫瑰繁殖方法主要有：扦插、压条、分株等[4-5]，然而这些方法的繁殖率较低，已不能满足消费需求。组织培养技术不仅克服了常规繁殖方法繁殖系数低的缺点，还可以在短期内获得大量生长发育一致的苗木，具有生产周期短、生产成本低、种苗产量高、经济效益显著等优势[6，7]。目前，组织培养技术在玫瑰快繁中的应用已经有研究报道[8-11]，但仍存在诱导率低、生根率差、成活率低等问题。为此，本研究以“大马士革”玫瑰为试材，从外植体取材、激素配比等方面探讨玫瑰当年生枝条快速繁殖问题，以期为玫瑰的组培快繁提供理论依据和技术支持。 　　1材料与方法 　　1.1试验材料 　　“大马士革”玫瑰品种由新疆生产建设兵团第四师农业科学研究所芳香植物种质资源圃提供。选择生长健壮、无病虫害的二年生健康植株作试材，取当年生枝条顶端的嫩茎作为本试验外植体材料。 　　1.2试验方法 　　1.2.1外植体的准备与培养选取生长健壮的二年生玫瑰植株，剪取当年生带有腋芽的嫩茎，置于自来水下冲洗 30 min，按照上（未木质化）、中（半木质化）、下（完全木质化）将嫩茎剪成多个小段，且每一段均含有至少1个腋芽，做好标记。外植体灭菌参照张振超等的方法[12]。所有茎段先用75%乙醇消毒30 s，无菌水冲洗1～2次，后用0.1%氯化汞消毒20 min，之后再用无菌水冲洗3～5次。在超净工作台内，将无菌茎段倾斜插入培养基上，保持腋芽朝上，置于培养室培养，光照度为2 000 lx，温度（25±1） ℃，光照时间12 h/d，观察统计腋芽出芽情况。 　　1.2.2不同无机盐浓度对腋芽萌发的影响在超净工作台内，将无菌茎段倾斜插入添加了0.1 mg/L NAA和1.0 mg/L 6-BA的MS、1/2MS、1/4MS培养基（均添加0.7%琼脂、3%蔗糖，pH值5.8～6.0）上，培养20 d后统计茎段上的腋芽萌芽率。 　　1.2.3不同取材时期对腋芽萌芽的影响分别于7、9、11月的中旬，于晴天的上午采集当年生枝条，剪取中部带有腋芽的半木质化茎段，经消毒处理后接种于筛选出的优良培养基上（MS+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA，含0.7%琼脂、3%蔗糖，pH值5.8～6.0）进行诱导培养，每个处理每个组培瓶接种10个无菌外植体，每个培养基接种7瓶，培养20 d后统计腋芽萌发率，其计算公式如下：萌发率=（腋芽萌发的带芽茎段数/接种的带芽茎段总数）×100%。 　　1.2.4不同激素配比对玫瑰腋芽萌发的影响将消毒处理的茎段接种于含有不同浓度NAA 和6-BA组合的MS培养基上。每瓶接种4个外植体，每个处理每次接种27瓶（108个芽），重复3次，20 d后统计腋芽萌发率。待初代培养分化产生的不定芽长到2 cm左右时，将其分开切成单个芽，之后接种于添加不同浓度NAA和6-BA组合的MS增殖培养基上（表1）。每瓶接种5个，每个处