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山银花适宜采收期的研究 　　[收稿日期] 2014-01-24 　　[基金项目] 重庆市科技惠民项目（CSTC2013jcsf1009）；重庆市卫生局中医药科技项目（Z；四川省科技成果转化项目（2013SC0021）；科技部科技惠民项目（2013GS500102） 　　[通信作者] *李隆云，研究员，主要从事中药材种植与质量评价研究，Tel：（023E-mail：lilongyun8@163.com 　　[摘要] 为了确定山银花（灰毡毛忍冬）的适宜采收期，测定不同发育时期的花蕾外观形态、产量和质量，比较一日内不同时段采摘花蕾的质量。结果表明，开花型和花蕾型灰毡毛忍冬不同发育阶段的花蕾外观形态具有较大的差异；随着花蕾发育，产量逐渐增加；开花型灰毡毛忍冬花蕾开放后（银花期、金花期）绿原酸含量极显著降低，开花前（幼蕾期、青色期、大白期）质量无显著差异；花蕾型灰毡毛忍冬黄白期灰毡毛忍冬皂苷乙显著降低，幼蕾期和青白期质量无显著差异。一日内不同时段采摘的灰毡毛忍冬绿原酸和3，5-二咖啡酰奎宁酸含量有显著差异。开花型灰毡毛忍冬的适宜采收期为大白期，采摘时段为10：00以前和18：00以后，花蕾型灰毡毛忍冬的适宜采收期为青白期，采摘时段为8：00以前和18：00以后。 　　[关键词] 灰毡毛忍冬；采收期；产量；绿原酸；3，5-二咖啡酰奎宁酸；灰毡毛忍冬皂苷乙；川续断皂苷乙 　　灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides是我国重要大宗药材山银花的基原植物之一，花蕾含有有机酸、黄酮类、皂苷类等化学成分，具有清热解毒，凉散风寒的功效，社会需求量极高[1-2]。灰毡毛忍冬生态适应性强、产量高、绿原酸和皂苷等活性成分含量高，在重庆、湖南、贵州、四川等地广泛种植[3]。 　　药材采收是中药材生产中的重要环节，直接影响着药材的质量与产量[4]。灰毡毛忍冬花蕾簇生，花期短，采收集中方便是其主要的农艺特征，一般采收期8～12 d，但若采收不适时，会导致减产或影响药材质量。本研究分别选取开花型和花蕾型2种灰毡毛忍冬品种，观测不同时期花蕾的外观形态、产量和质量，以及一日内不同采摘时期的花蕾质量，从而确定灰毡毛忍冬的适宜采收期。 　　1 材料 　　开放型灰毡毛忍冬选用野生混合种群，取自重庆市秀山县钟灵乡马路村种植基地；花蕾型灰毡毛忍冬选用“渝蕾1号”良种，取自秀山县清溪镇南龙村种植基地。不同花蕾发育阶段和一日内不同采摘时段均取至长势良好、无病虫害、有代表性的单株，每处理重复3次。采摘的花蕾及时采用蒸气杀青干燥方法加工[5]。 　　绿原酸、咖啡酸和木樨草苷对照品购自中国食品药品检定研究院，批号分别为110753-200413，110885-200102，111720-200602。3，5二咖啡酰奎宁酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙对照品购自成都曼思特生物科技有限公司，纯度98%（HPLC）。流动相为色谱纯，其余试剂为分析纯。 　　岛津LC-20AT高效液相色谱仪，SPD-M20A二极管阵列检测器，Lcsolution色谱工作站；Alltech ELSD 2000ES蒸发光散射检测器。 　　2 方法 　　2.1 绿原酸、咖啡酸、木樨草苷、3，5二咖啡酰奎宁酸含量测定 　　2.1.1 色谱条件 phenomenex Synergi Hydro-RP 80A C18色谱柱（4.6 mm×250 mm， 4 μm）；流动相为乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液，梯度程序：0～10 min，14%A；10～20 min，14%～20%A；20～30 min，20%A；30～45 min，20%～90%A；45～60 min，90%～14%A。流速1.0 mL?min-1；检测波长327 nm，322 nm，354 nm。 　　2.1.2 线性关系考察 精密称取绿原酸、咖啡酸、木樨草苷和3，5二咖啡酰奎宁酸对照品适量，分别加甲醇制成含绿原酸0.49 g?L-1，咖啡酸0.21 g?L-1，木犀草苷0.24 g?L-1，3，5二咖啡酰奎宁酸0.16 g?L-1对照品溶液。分别吸取以上4种对照品溶液各0.5，1，5，10，20 μL进样分析。以进样量（X）为横坐标，峰面积（Y）为纵坐标，进行线性回归，绿原酸回归方程Y= 2.275 079e-007X+2.765 879 7e-003，r=0.999 9，线性范围为24.5～980 g?L-1；咖啡酸回归方程Y=2.591 248e-007X+6.364 204e-003，r=0.999 8，线性范围为10.5～420 g?L-1；木樨草苷回归方程Y=1.793 146e-007X-9.420 646e-004，r=0.999 9，线性范围为12～480