《结核病实验室检查的临床意义》.ppt

实验结果的解释 阴性结果 提示患者体内不存在针对结核杆菌特异的效应T细胞。 假阴性结果： ①感染阶段不同；②少数免疫系统功能不全患者 阳性结果 提示患者体内存在针对结核杆菌特异的效应T细胞，患者存在结核感染。但是否是活动性结核病，需结合临床症状和其它检测指标综合判断。 假阳性结果： ① 4种环境分枝杆菌感染时：M.kansasii（堪萨斯）、M.szulgai（苏氏）、M.marinum（海）、M.gordonae（戈登） 方法学的优点 检测特异性的提高 帮助临床区分卡介苗接种和环境分枝杆菌感染引起的“假阳性”，避免了临床的无效用药 检测灵敏度的提高 有利于临床对结核病的早发现、早治疗，避免了疾病的传播与扩散 快速 48小时出结果 方法学的局限 不能区分活动性TB与潜伏感染 不能够提示临床患者的病变部位，需要结合临床的判断 目前还不能够根据斑点数量的多少来判断患者是活动性结核病或是潜伏感染者 不适合用于结核病患者治疗的疗效监测 检测收费高（600-700元/次） 体外r-干扰素释放试验 ????????活动性结核病通过有效的抗结核治疗后，结核杆菌载量下降，效应T细胞数量会随之减少，所以理论上IGRA结果应从阳性转变为阴性，但临床实践中发现IGRA结果转阴率非常低。2012年发表的一篇meta分析中指出，T-SPOT.TB在结核病患者抗结核治疗后转阴率为5.71%-13.93%，说明IGRA在评价抗结核治疗方面作用是有限的。 ?Chiappini E, Fossi F, Bonsignori F, et al. Utility of interferon-γ release assay results to monitor anti-tubercular treatment in adults and children. Clin Ther, 2012, 34: 1041-1048. IGRA在评价抗结核治疗中的作用是有限的 结核病 实验室检查 细菌学检查 免疫学检查 分子生物学检查 涂片染色镜检 分枝杆菌分离培养 分支杆菌药敏试验 分枝杆菌菌种鉴定 体液免疫学诊断 细胞免疫学诊断 聚合酶链反应（PCR） DNA测序 DNA探针技术 基因芯片技术 分子生物学检测方法 近年来核酸扩增技术和杂交分析技术的发展，为分枝杆菌的检测、鉴定和药敏实验提供了极大的方便，可将诊断时间从几周降低到几天甚至是几个小时。研究、应用报道较多的结核病基因诊断技术主要包括聚合酶链反应(PCR)、核酸探针杂交、DNA序列测定、基因芯片、基因分型等。 实时荧光PCR技术 本实验室所使用的结核分枝杆菌核酸检测试剂盒（荧光PCR法）采用单管单人份的分装技术，操作过程非常简便；并引入荧光检测技术，简化了检测步骤，并且整个扩增及扩增后检测都无需打开扩增管盖，从根本上克服了PCR遗留污染。荧光探针PCR检测技术综合了PCR扩增的高敏感性、探针杂交的高特异性及荧光能量转移的实时跟踪特性，使检测的准确性大大提高，并可充分保证检测的稳定性及重复性。 结核杆菌PCR检测的临床意义 1.在痰菌阴性结核快速诊断有重要临床应用价值。 在临床工作中，痰菌阴性，经临床综合分析后诊断为肺结核的患者，约占肺结核患者的60%-70%。有报道指出痰菌阴性的肺结核患者，如果未经抗结核治疗，经过1-3年的随访，将有40%-60%的患者发展为菌阳甚至更典型的肺结核。所以获得病原学的诊断至关重要 结核杆菌PCR检测的临床意义 2012年发表在中国防痨杂志中的一篇文章的研究指出在476例菌阴肺结核病患者中，PCR法检出116例阳性，检测的灵敏度为24.4% 而菌阳肺结核患者的检测灵敏度为97.0% 结核杆菌PCR检测的临床意义 2、PCR法可以作为临床痰涂片和痰培养的补充，为临床诊断和治疗提供帮助 涂片阳性并不能区分是结核分枝杆菌还是非结核分枝杆菌，这两者的治疗是有很大的差异的，NTM对于常用的抗结核药经常都是无效的，所以对于涂片阳性的标本，很有必要在在做MTB-DNA的检测，进一步确认是否是真的MTB的感染。 结核杆菌PCR检测的临床意义 3.可作为结核性关节炎和泌尿系统结核早期诊断的一个可靠指标。 118 例疑似结核病患者, 其中关节炎患者 52 例, 泌尿系感染患者 66 例, 应用 FQ-PCR 技术分别检测患者关节腔积液和尿液中的 TB-DNA ,并与抗酸染色法的检出率比较。 结果 52 例关节炎患者中 ,确诊结核性关节炎患者36 例 , TB-DNA 阳性 22 例,22 例全部为确诊病例, 阳性率61.1%。抗酸染色的阳性只有2例,阳性率5.6%; 66 例泌尿系统疾病患者中, 确诊泌尿系结核患者52例 , TB-DNA 阳性 32例 ,32 例全部为确诊