肿瘤血管生成拟态(VM)：进展与挑战.ppt

肿瘤血管生成拟态(VM)：进展与挑战 血管生成拟态(Vasculogenic mimicry) VM是1999年美国Iowa’s大学的Maniotis等在人眼葡萄膜黑色素瘤组织中发现了一种新的肿瘤血液供应模式。 国内是我们研究小组最先开展的（2000年），该研究方向先后获得2项国家自然科学基金重点项目、5项国际自然科学基金面上项目、1项中-瑞合作项目、1项教育部博士点项目资助，总资助经费近1500万元。国内目前很多从事VM研究课题组所使用的技术为本项目组首次报道。 血管生成拟态的特点 管道内没有血管内皮细胞衬覆。 肿瘤细胞模仿机体血管生成而形成瘤细胞条索并围成管道，而血液则在这无内皮细胞管道中流动。 一层细胞外基质（PAS阳性物质）将瘤细胞同血管壁分离，肿瘤细胞在VM管壁外表面平行排列。 缺氧是一把双刃剑，既抑制瘤细胞增殖和诱导其凋亡，又能够诱发其产生基因表型变化和蛋白表达改变等以适应生存环境的恶化； 在缺氧环境中，黑色素瘤细胞能够通过HIF-1α上调MMP-2、MMP-9及VEGF等蛋白的表达，形成VM； 侵袭力越强的黑色素瘤组织中的VM数目越多，而VM越多黑色素瘤发展越快、预后越差 导致四肢黑色素瘤SFP疗法远期效果不理想的原因,缺血缺氧虽然在早期能够抑制其生长转移，但治疗后期却诱导其更易侵袭和转移 缺血组HIF-1α, MMP-2, MMP-9 和 VEGF表达均高于对照组； MMP-2和MMP-9在瘤组织与骨骼肌的交界部位阳性较强； 缺氧环境中的黑色素瘤细胞更富有侵袭力，向血供丰富的部位浸润生长； 缺氧环境中，肿瘤细胞通过HIF-1α上调MMP-2、MMP-9及VEGF等表达，促进VM形成； VM作为缺血缺氧环境中黑色素瘤主要的血供模式，满足瘤细胞的血液供应。 后肢组肿瘤细胞CK-18染色指数明显高于腹腔组 腹腔组黑色素瘤组织HIF-1α表达低于后肢组 在肿瘤生长过程中，肿瘤组织内液体间质压力明显增高，这种压力可阻止血管或淋巴管内皮细胞进入瘤组织。 肿瘤周围组织的压力增加诱导肿瘤细胞表达更多的侵袭转移相关的蛋白，促进VM形成。 瘤组织内压力升高促使肿瘤向周围组织浸润或远处转移。 后肢组肿瘤细胞表达MMP-2和MMP-9表达明显高于腹腔组 腹腔组MMP-2 和 MMP-9 mRNA表达水平降低 肿瘤细胞生长和进化受到多种因素的影响，不同微环境影响肿瘤组织的生长和浸润； 环境选择性进化压力促进高侵袭性肿瘤细胞亚克隆的形成； 腹腔镜改变腹腔内压力可诱导结肠癌荷瘤小鼠发生肝转移； 肿瘤IFP升高导致瘤组织相对处于缺氧状态，缺氧能够诱导黑色素瘤细胞上调HIF-1α、MMP-2和MMP-9的表达，促进肿瘤组织内VM形成 。 黑色素瘤组织可观察到线形分布、核深染、胞浆浓缩的瘤细胞，呈网络状分布； 这种坏死细胞从形态、分布、分子调控和超微结构等均不同于的凋亡、自噬和胀亡； 这种坏死细胞形成的裂隙与VM和内皮依赖性血管相通； 这种有规律的群体肿瘤细胞主动死亡可能是血管生成，尤其是VM形成的空间结构基础，命名为线形程序性坏死(Linearly Patterned Programmed Cell Necrosis, LPPCN)。 肿瘤组织内出现网络状分布LPPCN LPPCN结构还表现出与内皮依赖性血管相通的趋势 LPPCN首先出现在实体的肿瘤组织中央 LPPCN的结局：形成功能性微循环或者发展成为大片坏死 41.94%的瘤组织中存在LPPCN，具有LPPCN患者的5年生存率为19.23%，10年生存率为5.77%。 LPPCN细胞caspase-3，caspase-9，Bax染色阳性； caspase-8，caspase-7，TNFα,TRAIL，FAS，FASL染色呈阴性； Bcl-2在LPPCN和其他肿瘤组织中均可见表达； TUNEL染色后阳性的肿瘤细胞随机散在分布； EndoG mRNA在缺氧组中的表达显著高于对照组 缺氧组Dnase1 mRNA表达明显低于对照组 黑色素瘤细胞主要通过增加EndoG mRNA表达切割DNA VM促进了肿瘤细胞的血道转移； 具有VM的肿瘤患者临床预后差，5年生存率为0； 以血管内皮为靶的抗血管药物对于治疗具有VM的肿瘤疗效不佳。 目前黑色素瘤的治疗方式有很多种：如手术治疗、生物治疗、免疫治疗等 多西环素和内皮抑素可以抑制黑色素瘤组织MMPs的表达和内皮细胞的成熟，影响黑色素瘤血液供应的VM和内皮依赖性血管的形成，抑制黑色素瘤的生长。 动物分组及给药：内皮抑素组（E）、多西环素组（D） 、内皮抑素加多西环素组（DE)和对照组（C） 三个药物处理组小鼠肿瘤生长均较对照组慢，其中D组与C组，DE组与C组的小鼠肿瘤平均体积间差异有统计学意义 各处理组的MV和VM计数均低于对照组 肿瘤细