一种新型可注射性组织工程水凝胶双组分引发体系细胞毒.PDF

第50 卷 第5 期 2005 年3 月 论 文 一种新型可注射性组织工程水凝胶的双组分 引发体系细胞毒性的负协同效应 段世锋 朱 文 俞 麟 丁建东* (复旦大学高分子科学系, 聚合物分子工程教育部重点实验室, 上海 200433. * 联系人, E-mail:jdding1@) 摘要 化学交联水凝胶有望成为一类新型可注射性组织工程水凝胶, 但是合适的、低毒性的引发体系是 其瓶颈. 为了考察此类化学交联水凝胶的可行性, 本文对过硫酸铵(APS)/ 四甲基乙二胺(TEMED)氧化 还原引发体系的体外细胞毒性进行了初步研究. 首先考察了不同引发剂浓度对大单体自由基聚合反应 速率的影响, 以保证所考察的引发体系的剂量足以导致在体温和水环境中迅速凝胶化. 采用MTT 定量 检测和光学显微镜直接观察的方法研究了引发体系对 NIH/3T3 细胞的细胞毒性. 发现上述两种化学物 质的细胞毒性呈现负协同效应, 即APS/TEMED 组在高剂量时的细胞毒性比单独使用APS 或TEMED 还要低. 关键词 组织工程 可注射性材料 水凝胶 引发剂 细胞毒性 细胞毒性和细胞响应特性是生物材料研究中的 以做到均匀. 当然, 需要升温或需要在有机溶剂环境 [1] 中使用的引发体系显然也不适合用于可注射性组织 重要科学问题 . 生物材料在组织工程中有不可替代 [2] 工程水凝胶的制备. 故有必要采用氧化还原引发体 的作用 . 大部分组织工程材料采用多孔支架的方 [3~7] 系, 在生理温度和水环境中原位聚合以包埋细胞. 式 , 但是, 可注射性的高分子水凝胶也构成了独 特的一大类组织工程材料. 可注射性材料不需要致 水溶性的过硫酸铵(APS)/ 四甲基乙二胺(TEMED) [12] 孔和动用手术刀, 可以适应被修复组织的复杂外形, 双组分氧化还原体系是一种常见的聚合反应 和化 [13] 在对于材料力学强度要求不高的场合有十分独到的 学交联水凝胶制备 的自由基聚合引发体系. 但是 优点. 虽然骨水泥等可注射性填充材料已经被临床 当作为可注射性组织工程材料使用时, 我们希望所 [8] 选择的引发体系一方面容易引发自由基交联反应, 应用 , 但是可注射性组织工程材料还处于研发阶 段. 现有的主流可注射性组织工程水凝胶为 Pluronic 另一方面不会造成严重的细胞毒性. 在交联反应中, [9] 细胞与整个反应体系相接触, 每个化学组分的细胞 嵌段共聚物和藻酸盐类 . 它们均为物理凝胶, 其稳 毒性都要进行研究. 本文首先考察上述引发体系引 定性尚存在不足, 并且我们已经难以获得自主知识 发聚乙二醇大单体的凝胶化时间, 包括引发剂浓度 产权. 采用共价交联的化学凝胶尝试进行可注射性 与凝胶化时间的关系.