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番茄黄花卷叶病基因检测
番茄黄花卷叶病的基因检测;实验原理
番茄黄花卷叶病概况
抗病检测主要内容与技术方案
原理(Ty-1 、Ty-2、Ty-3 )(每组选1个)
数据分析实例
涉及实验技术
;表型; 重要农艺性状基因连锁标记的筛选技术;MAS与表型选择的比较;MAS存在的问题;发展饱和的遗传图谱,寻找与目的基因紧密连锁的两侧标记,提高基因型与表现型的一致性。
从全基因组水平上对QTL展开研究,包括QTL的数目、位置、效应以及QTL与QTL间、QTL与环境的互作、QTL的一因多效性等,充分发掘QTL的信息,选择最佳组合进行标记辅助选择。
QTL筛选与品种选育过程相结合,如选择商业品种作为作图亲本之一,或利用回交高代QTL方法将筛选与育种同步进行。
将常规选择与标记辅助选择相结合,针对不同性状的特点,研究高效的选择方法。
各研究机构的良好合作也是MAS成功应用的重要基础。
;;;概况;
;;;; 田间验证结果;;???茄中至少有15个抗病基因已被分离鉴定,其中抗黄化曲叶病毒病基因主要有TY-1、TY-2、TY-3 、TY-4;抗病检测主要内容与技术方案;Ty-1 基因;;Ty-2 基因; Garcia B E, et al. Co-dominant SCAR marker for detection of the begomovirusresistance Ty-2 locus derived from Solanum habrochaites in tomato germplasm,,2007
许爽等,多重PCR技术鉴定番茄Ty-2和Ty-3基因及田间验证,2009;Ty-3 基因;;Ty-1抗性基因检测结果
; Ty-1 基因的 398 bp特异片段经 TaqⅠ酶切后为 303 bp 和 98 bp 的特异片段,ty-1 基因的 398 bp 的特异片段不能被 TaqⅠ酶切。
材料 1,2,3,5,9,10 的基因型为 Ty-1/ty-1;
材料 4,7,8 的基因型为 Ty-1/Ty-1;
材料 6,7,8 的基因型为 ty-1/ty-1。;表 Ty-1酶切反应体系(10μL)
;Ty-2 抗性基因检测结果( SCAR1 );Ty-2 抗性基因检测结果( SCAR2 );Ty-3抗性基因检测结果;涉及实验技术;1. 获取细胞:
研磨、匀浆……
2. 裂解细胞:
冻融、SDS……
3. 分离DNA:
CTAB 、苯酚……
4. 纯化DNA
乙醇、RNA酶……;琼脂糖凝胶电泳;PCR——番茄PCR反应体系(10μL);PCR——PCR反应程序
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