《第四章生物信息的传递(下)从mRNA到蛋白质》课件.pptVIP

Tom = transport across outer membrane Tim = transport across inner membrane 有些前导肽含有“止运入”肽段，当该肽段被跨膜通道中的受体蛋白识别时，所运输的多肽将被定位在膜上。 (二) 叶绿体蛋白的转运 膜 基质 类囊体 1、运转过程有如下特点： ①活性蛋白水解酶位于叶绿体基质内，这是鉴别翻译后运转的指标之一。 ②叶绿体膜能够特异地与叶绿体蛋白的前体结合。 ③叶绿体蛋白质前体内可降解序列因植物和蛋白质种类不同而表现出明显的差异。 2、蛋白运转过程 （1）叶绿体上的蛋白在N端含有前导肽，能引导其穿过叶绿体膜进入基质，在基质中有特异的蛋白酶加工切去。 （2）对类囊体中的蛋白，除 N端含有导肽，引导其穿过叶绿体膜进入基质外，还含有导向类囊体的前导肽，引导其穿过类囊体膜进入类囊体。 3、叶绿体与线粒体蛋白质转运比较 （1）膜上都有各自特定的受体蛋白； （2）需要能量，利用ATP和质子动力势； （3）前导肽； （4）某些HSP分子相同 （5）受体蛋白复合体是不同的。 （三）核定位蛋白的运转机制 核蛋白：在细胞质内合成后，进入细胞核内发挥功能的一类蛋白质。 核定位信号（nuclear localization sequence,NLS）：引导蛋白质进入细胞核的一段信号序列。 NLS是存在于亲核蛋白内的一些短的氨基酸序列片段，富含碱性氨基酸残基，如Lys、Arg，此外还常含有Pro。 NLS的氨基酸残基片段可以是一段连续的序列，也可以分成两段，两段之间间隔约10个氨基酸残基（核质蛋白）。 NLS序列可存在于亲核蛋白的不同部位，在指导完成核输入后并不被切除。 NLS只是亲核蛋白进入核的一个必要条件而非充分条件 NLS受体为核转运因子α,β，它们组成的异源二聚体是可溶性受体。NLS识别核转运因子并与其结合,停在核孔处,依靠GTP水解提供能量进入核。 核糖体附着在细胞内膜（inner membrane） 合成蛋白质 通过外膜 扩散到细胞外 三、细菌蛋白质的易位 穿过内膜进入间质 翻译转运或翻译后转运机制 信号肽（N端信号序列）: 分泌蛋白的N端15～30个AA的前导序列为越膜信号 1—10aa 15—20aa 15—30 aa 1—3 aa 富含Arg+, Lys+ ----- 富含 Phe, Leu, Ile… 亲水螺旋 疏水螺旋 酶切割位点 反向平行，形成 hairpin 插入到膜中 作用机制： 信号序列带正电的区段与带负电的磷脂膜互作, 引导蛋白质进入内膜, 疏水区段嵌入磷脂膜内或形成αhelix。 ◆ 不同蛋白质其半衰期差异较大。 ◆ 蛋白质半衰期与N端氨基酸残基有一定关系。 四、蛋白质的降解 ◆ 生物体内蛋白的降解是一个有序的过程。 在大肠杆菌中，许多蛋白质的降解是通过一个依赖于ATP的蛋白酶（称为Lon）来实现的。 在真核生物中，蛋白质的降解需要Ubiquitin，一个有76个氨基酸残基组成极为保守的蛋白参与。与Ubiquitin相连的蛋白将被送到一个依赖于ATP的蛋白质降解系统。 2. 降解涉及到的三种重要酶 泛素活化酶 (ubiquitin-activating enzyme,E1) 泛素结合酶 （ubiquitin-conjugating enzyme,E2) 泛素蛋白连接酶 (ubiquitin-proteinligating enzyme,E3) 3.有序降解机理 第一步是Ｅ１激活泛素分子，激活过程需要来自ＡＴＰ的能量；激活后的泛素分子再被转运到Ｅ２上，后者负责把泛素分子捆绑在需要降解的蛋白质上，在这个过程中Ｅ２并不认识被指定要降解的蛋白质，然后由Ｅ３对要被降解蛋白的进行认定。 过程：在Ｅ３指引下，Ｅ２携带泛素分子接近Ｅ３所指定的蛋白质，把泛素分子“捆绑”在所指定的蛋白质上。这个过程反复进行。这样，被指定的蛋白质上会贴上一批泛素标签，形成一个个短的泛素链。因为只有泛素分子达到一定的量才能起到标签作用，这时贴上了“死亡标签”的蛋白质，就会走向细胞中的“垃圾桶”──蛋白酶体。 泛素化过程 泛素 C O- O + HS-E1 ATP AMP+PPi 泛素 C O S E1 HS-E2 HS-E1 泛素 C O S E2 泛素 C O S E1 被降解蛋白质 HS-E2 泛素 C O S E2 泛素 C NH 被降解蛋白质 O E3 阿龙·切哈诺沃、阿夫拉姆·赫什科和欧文·罗斯 谢谢使用！ * 在70S起始复合物形成过程中，核糖核蛋白体的P位上已结合了起始型甲酰蛋氨酸tRNA，当进位后，P位和A位上各结合了一个氨基酰tRNA，两个氨基酸之间在核糖体转肽酶作用下，P位上的氨基酸提