TTC（四唑）法快速测定作物种子生活力.pptVIP

二、实验原理 作物活种子的胚在呼吸作用过程中能进行氧化还原反应，而死种子则无此反应。TTC是一种无色指示剂，当TTC溶液渗入活种子胚细胞内,TTC作为氢受体而被脱氢辅酶(NADH2或NADPH2)上的氢还原时，无色的TTC转变为红色的三苯甲基（TTF）；如果作物种胚死亡或种胚生活力衰退，则不能染色或染色较浅，因此，可以根据种胚染色的部位或染色的深浅程度来鉴定种子的生活力。 五.观察鉴定 观察时最好使用10-100倍体的放大镜进行观察，种胚为红色为活种子，而不能染色或染色较浅的为无活性种子 小麦种子四唑法测定结果的鉴定标准 黑色部分表示染成红色，有生活力组织， 白色部分表示不染色的死组织， 1—6有发芽力： 1 整个胚染成鲜红色 2-5 盾片末端未染色 6 胚根尖端不染色 7—16 无发芽力： 7 胚根四分之三以上不染色 8胚芽不染色（一点也不行） 9 盾片中部和盾片节不染色 10 胚轴不染色 11 盾片末端和胚芽尖端不染色 12 胚上半部分不染色 13 盾片不染色 14 盾片、胚根和胚根鞘不染色 15 染成模糊的淡红色 16 整个胚不染色 * * TTC(四唑)法快速测定作物种子生活力 主讲人：杨振华 生物工程学院 主要内容 实验原理 2 教学目标 1 实验方法与步骤 4 实验器材 3 实验数据计算及处理 6 结果观察鉴定 5 一、教学目标 1、 掌握TTC染色法测定种子生活力的基本原理 2、 掌握TTC法测定种子生活力的基本操作程序 3、 掌握判别种子有无生活力的鉴定标准 4、 掌握种子活力的计算方法及试验误差的处理方法 TTF 红色， 溶于水 1、种子材料 主要农作物种子（小麦） 2、 器具 电热恒温箱、手持放大镜 刀片、小镊子、培养皿、烧杯 量筒、玻璃棒、吸水纸等 三、实验器材 3、试剂 四唑氮、磷酸盐缓冲液 四、实验方法步骤 数取试样 TTC试剂配制 种子预措预湿 4、染色 染色 清洗 6、鉴定、统计结果 1 4 3 2 5 鉴定原则 1.凡是胚的主要构造染成鲜红色，为有生活力种子 2.凡是胚的主要构造（胚芽、胚轴、胚根）局部不染色或染成异常的颜色和光泽，并且活营养组织不染色部分已超过二分之一，为无生活力种子 3.凡是完全不染色或染成无光泽的淡红色活灰白色，且组织已软腐或者异常，虫蛀，损伤，腐烂的为死种子 六、实验数据计算及处理 种子活力（％）＝有活力的种子数/种子总数×100% 活种子百分率（%）=（染成红色的种子粒数/实验种子的总粒数)×100% 依据以上公式，将4份的试验数据算出，并且4份重复间最大容许差距不得超过《生活力测定重复间的最大容许差距》规定，若数据符合此规定取平均数，数值近似到整数，若不符合此规定，实验失败。 * * * *