实验血清中总胆固醇的测定.pptVIP

血清中总胆固醇的测定 （1） （1）取3支试管，按下表加入试剂: 思考题 1、简述胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇的基本原理？ 2、分析影响实验结果的因素有哪些？如何克服？ * * * * 实验三 （胆固醇氧化酶法） 一、实验目的 学习胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇的原理。 掌握血清总胆固醇的测定方法及操作技术。 （3）H2O2+4-氨基安替吡啉（4-AAP）＋苯酚 游离胆固醇＋FAA 胆固醇酯酶 H2O ＋红色醌类物质 过氧化物酶 （POD） 510nm 光吸收法测定 相对血清总胆固醇浓度 二、实验原理 血清总胆固醇 游离胆固醇 胆固醇酯 胆固醇氧化酶 胆甾烯酮+H2O2 （2）游离胆固醇 三、实验器材 材料：人血清 试剂：总胆固醇测定试剂盒 用具：分光光度计，微量移液枪，试管，试管架，恒温水浴锅 样品管2 – 10.0 1.0 标准管 1.0 – 10.0 10.0 10.0 – 血清样品(uL) – – – 标准液(uL) 1.0 1.0 1.0 工作试剂(mL) 样品管3 样品管1 试剂空白管 试剂 四、实验步骤 充分混匀，37℃ 水浴中保温15min； 冷却至室温后，510nm处比色 比色方法：以空白管调零，读取标准管及样品管光密度值。 （2）计算： 依据朗伯-比尔定律： A=KLC 标准管胆固