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- 2018-11-29 发布于天津
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实验二、细菌的简单染色与革兰氏染色教学幻灯片.ppt
实验二细菌的简单染色与革兰氏染色;2、革兰氏染色
革兰氏染色是采用二种染料对细菌细胞进行染色,初染采用的是结晶紫,复染采用的是番红。
G+菌:细胞壁较厚,肽聚糖含量较高,基本不含类脂,肽聚糖分子交联度较紧密,故经乙醇处理后,肽聚糖网孔因脱水而明显收缩,使壁的通透性降低保留着结晶紫-碘复合物,所以复染液番红不能进入,细胞显紫色。
G-菌:细胞壁薄,肽聚糖含量低,类脂含量高,肽聚糖分子交松散,故经乙醇处理后,壁会出现较大的缝隙,细胞透性增大,结晶紫-碘复合物易被洗脱出来,再经番红复染后使细胞显红色。 ;三、实验器材
1、菌种:普通变形杆菌、表皮葡萄球菌
2、染色剂:简单染色液(吕氏碱性美蓝染液);革兰氏染色液(草酸铵结晶紫染液、卢戈氏碘液、95%乙醇、番红染液)
3、仪器或其他用具:载玻片、生理盐水、酒精灯、接种环、香柏油、二甲苯、显微镜、擦镜纸、滤纸等
;四、操作步骤
1、简单染色
涂片 加热干燥固定 染色 1min 水洗
干燥 镜检
2、革兰氏染色
涂片 加热干燥固定 结晶紫初染 1min 水洗
碘液媒染 1min 水洗 95%乙醇脱色 30sec
水洗 番红复染 2min 水洗 镜检
操作要点:1、加热干燥固定时的温度不要太高,否则细胞壁会受到损伤,细
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