可逆加成断裂链转移策略制备可识别转铁蛋白的抗原决定基印迹-色谱.PDFVIP

２０１４年１０月 Ｖｏｌ．３２ Ｎｏ．１０ Ｏｃｔｏｂｅｒ ２０１４ ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ １０２９～１０３３ 庆贺吴采樱教授八十华诞专刊⁃研究快报 ＤＯＩ：１０．３７２４／ ＳＰ．Ｊ．１１２３．２０１４．０６０２９ 可逆加成⁃断裂链转移策略制备可识别 转铁蛋白的抗原决定基印迹微球 １，２ １ １，２ １，２ １∗ １ １ 李沁然 ，　 杨开广 ，　 李森武 ，　 刘键熙 ，　 张丽华 ，　 梁　 振 ，　 张玉奎 （１． 国家色谱研究分析中心，分离分析化学重点实验室，中国科学院大连化学物理研究所，辽宁 大连 １１６０２３； ２． 中国科学院大学，北京 １０００３９） 摘要：应用可逆加成⁃断裂链转移（ＲＡＦＴ）策略制备了一种抗原决定基表面印迹微球。 这一工作以转铁蛋白的抗原 决定基Ｎ端九肽作为模板，通过共价键合的方式固载于修饰了戊二醛的硅胶颗粒表面。 然后以甲基丙烯酸、甲基 丙烯酰羟乙酯为功能单体，甲叉基双丙烯酰胺为交联剂，偶氮二异丁腈（ＡＩＢＮ）为引发剂，Ｎ，Ｎ⁃二甲基甲酰胺为溶 剂，在三硫酯试剂２⁃（十二烷基三硫代碳酸酯基）⁃２⁃甲基丙酸的调控下，于７０ ℃进行活性⁃可控的聚合反应，制备得 到分子印迹微球。 该材料对模板抗原决定基的识别容量为２３６ ｍｇ／ ｇ，印迹因子为 １８９；对转铁蛋白的识别容量 为４９８ｍｇ／ ｇ，印迹因子为１６１，１２０ｍｉｎ 内可达到吸附平衡；在多蛋白质竞争识别中，该材料对转铁蛋白识别的印 迹因子远高于细胞色素Ｃ、乳球蛋白等其他竞争蛋白质的印迹因子。 以上结果证明，通过ＲＡＦＴ策略制备得到的抗 原决定基分子印迹材料在对抗原决定基具有良好的识别能力的同时，对模板抗原决定基对应的转铁蛋白也具有优 良的选择性、较高的识别容量和较快的识别速度。 关键词：可逆加成⁃断裂链转移（ＲＡＦＴ）；抗原决定基；分子印迹；蛋白质 中图分类号：Ｏ６５８　 　 　 文献标识码：Ａ　 　 　 文章编号：１０００⁃８７１３（２０１４）１０⁃１０２９⁃０５ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｐｉｔｏｐｅ ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ ｐａｒｔｉｃｌｅｓ ｆｏｒ ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｂｙ ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ ａｄｄｉｔｉｏｎ ｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｃｈａｉｎ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｓｔｒａｔｅｇｙ １，２ １ １，２ １，２ ＬＩ Ｑｉｎｒａｎ ，ＹＡＮＧ Ｋａｉｇｕａｎｇ ，ＬＩ Ｓｅｎｗｕ ，ＬＩＵ Ｊｉａｎｘｉ ， １∗ １ １ ＺＨＡＮＧ Ｌｉｈｕａ ，ＬＩＡＮＧ Ｚｈｅｎ ，ＺＨＡＮＧＹｕｋｕｉ （１．Ｎａｔｉｏｎａｌ ＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃＲ． ＆Ａ． Ｃｅｎｔｅｒ，ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ＳｃｉｅｎｃｅｆｏｒＡｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， Ｄａｌｉａｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ ＣｈｅｍｉｃａｌＰｈｙｓｉｃｓ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｄａｌｉａｎ １１６０２３，Ｃｈｉｎａ；