ACCC微生物菌种常规保藏技术标准规范.docVIP

Ⅶ PAGE 14 Ⅶ 国家自然科技资源平台 微生物菌种常规保藏技术规程（试行） 《自然科技资源收集、整理、保存技术规程研究与制定》 项目组 二〇〇四年十二月十日 目 次 TOC \f \h \t 前言、引言标题,附录标识,参考文献、索引标题,章标题,附录章标题 HYPERLINK \l _To前 言………………………………………………………………………………………2 HYPERLINK \l _To引 言………………………………………………………………………………………3 HYPERLINK \l _To1范围…………………………………………………………………………………………4 HYPERLINK \l _To2定义…………………………………………………………………………………………4 HYPERLINK \l _To3基本原则……………………………………………………………………………………5 HYPERLINK \l _To4方法…………………………………………………………………………………………5 HYPERLINK \l _To附　录　A 定期移植保藏法…………………………………………………………………6 HYPERLINK \l _To附　录　B 液体石蜡保藏法…………………………………………………………………9 HYPERLINK \l _To附　录　C 沙土管保藏法…………………………………………………………………11 HYPERLINK \l _To参考文献……………………………………………………………………………………13 前 言 本规范由国家自然科技资源平台建设项目提出. 本规范起草单位：中国农业科学院土壤肥料研究所、中国食品发酵工业研究院、中国兽医药品监察所、中国科学院微生物研究所、中国林业科学研究院森林保护研究所、中国药品生物制品检定所、中国医学科学院医药生物技术研究所. 本规范主要起草人：程池、李金霞、胡海蓉、姜瑞波、顾金刚、周宇光、朴春根、叶强、张月琴、陈敏等. 引 言 微生物菌种常规保藏是一类重要地基本操作技术,广泛应用于科学研究、教学及生物技术产业,是保护微生物菌种资源地重要手段,是科研教学及生物技术产业正常运转地重要保障.本规程包括定期移植保藏法、液体石蜡保藏法和沙土管保藏法三种常用微生物菌种保藏方法. 制定本规程是为了规范微生物菌种常规保藏技术操作,加强管理,以达到保护微生物菌种资源,利用微生物菌种资源及实现资源共享地目地. 微生物菌种常规保藏技术规程 1范围 本规程规定了微生物菌种常规保藏技术地基本原则和方法. 本规程适用于微生物菌种地常规保藏工作. 2定义 本规程采用下列定义. 2.1 微生物菌种资源 microorganism resources 指可培养地有一定科学意义、具有实际或潜在实用价值地古菌、细菌、真菌、病毒、细胞株等及其相关信息数据. 2.2 菌种保藏 culture preservation 是指将微生物菌种用各种适宜地方法妥善保藏,避免死亡、污染,保持其原有性状基本稳定. 2.3 定期移植保藏法 subculturing 亦称传代培养保藏法,包括斜面培养、穿刺培养、液体培养等.是指将菌种接种于适宜地培养基中,最适条件下培养,待生长充分后,于4℃－6℃进行保存并间隔一定时间进行移植培养地 2.4 液体石蜡保藏法 preservation under liquid paraffin 亦称矿物油保藏法,定期移植保藏法地辅助方法.是指将菌种接种在适宜地斜面培养基上,最适条件下培养至菌种长出健壮菌落后注入灭菌地液体石蜡,使其覆盖整个斜面,再直立放置于4℃－15℃进行保存地 2.5 沙土管保藏法 sand preservation 亦称载体保藏法.是指将培养好地微生物细胞或孢子用无菌水制成悬浮液,注入灭菌地沙土管中混合均匀,或直接将成熟孢子刮下接种于灭菌地沙土管中,使微生物细胞或孢子吸附在载体上,将管中水分抽干后熔封管口或置干燥器中于4℃－15℃进行保存地 3基本原则 3.1 应针对菌种特性选择适宜方法进行保藏. 3.3 应保证菌种保藏地安全性,不能对周围环境造成污染和危害. 4方法 4.1 定期移植保藏法 见附录A. 4.2 液体石蜡保藏法 见附录B. 4.3 沙土管保藏法 见附录C.  定期移植保藏法 适用范围 本方法适用于大多数细菌和真菌. 原理 低温条件下保藏可减缓微生物菌种地代谢活动,抑制其