第三章节 凝胶分离技术新.pptVIP

第三章 凝胶分离技术;优点： 1、凝胶为不带电荷的惰性物质，不与溶质分子发生任何作用，因此分离条件温和，产物收率高，重现性好； 2、应用范围广，所分离物质分子量覆盖面大，可分离从几百到数百万分子量的物质； 3、设备简单，操作方便，周期短，可反复使用。 凝胶分离已成为一种通用的分离方法，在生物大分子物质（蛋白质、酶、核酸、激素、多糖等）的制备与生产技术中被广泛应用。;第一节 凝胶分离原理;分离原理可用下式表示： VR = V0 + kVi 式中：VR：保留体积（洗脱体积） V0：柱床内存在于凝胶外面的水相体积 ——外水体积 Vi：凝胶颗粒内部所含的水相体积 ——内水体积 k：分配系数 ; 被分离物质分子很大，被完全排阻于凝胶颗粒之外： k = 0，VR = V0 ； 被分离物质分子很小，能完全自由进入凝胶颗粒内部： k =1，VR = V0 + Vi ； 中等大小的分子，只能达到部分凝胶颗粒内部： 0 ＜k ＜1，V0＜ VR ＜ V0 + Vi。;Vo、Vi的测定 ①V