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医微生物学细菌生理消毒
辐射杀菌法 紫外线 265~266nm 杀菌原理 用途与缺陷 电离辐射 β、γ射线 滤过除菌法 0.22um, 不耐热血清等,空气 超声波杀菌法 干燥与低温抑菌法 冷冻真空干燥保存菌种 化学消毒灭菌法(外用) 常用消毒剂的杀菌机制 使菌体蛋白变性或凝固 干扰微生物酶系统和影响其代谢 损伤细胞膜 选择原则 效果好 毒力低 便宜 消毒剂的主要种类 类别 作用机制 常用种类 酚类 蛋白变性,细胞膜损伤 石炭酸 醇类 蛋白变性 乙醇 氧化剂 氧化、蛋白沉淀 高锰酸钾、过氧乙酸、碘酒 重金属盐 氧化、蛋白酶变性 红汞、硫柳汞 表面活性剂 蛋白变性,细胞膜损伤 新洁而灭 染料 干扰氧化、抑制繁殖 龙胆紫 酸碱类 破坏膜、壁,蛋白凝固 醋酸、生石灰 烷化剂 蛋白质、核酸烷基化 环氧乙烷 消毒剂的应用 影响消毒灭菌效果的因素 消毒剂的性质、浓度与作用时间 微生物的种类与数量 温度 酸碱度 有机物 第二章 细菌的生理 细菌的生理活动包括摄取和合成营养物质,进行新陈代谢及生长繁殖。 第一节 细菌的理化性状 第二节 细菌的营养与生长繁殖 第三节 细菌的新陈代谢 第四节 细菌的人工培养 一、 细菌的理化性状 细菌的化学组成:水、无机盐、蛋白质、糖类、脂质和核酸等。 细菌的物理性状: 光学性质——细菌为半透明体。 带电现象——均带负电。其带电现象与染色反应、 凝集反应、抑菌和杀菌作用等密切相关。 半透性——细菌的细胞壁和细胞膜都有半透性。 渗透压——菌体内为高渗透压。 二、 细菌的生长繁殖 根据细菌所利用的能源和碳源的不同,将细菌分为两大营养类型——自养菌和异养菌。 自养菌(autotroph):以简单的无机物为原料,合成菌体成分。 异养菌(heterotroph):以多种有机物为原料,合成菌体成分并获得能量。所有的病原菌都是异养菌。 营养物质 水、碳源、氮源、无机盐、生长因子 酸碱度(pH) 温度 气体环境 专性需氧菌: 兼性厌氧菌:大多数病原菌属于此。 专性厌氧菌: 细菌生长繁殖的条件 为什么厌氧菌在有氧情况下不能生长? 原因: 1.缺乏氧化还原电势高的酶; 2.缺乏分解有毒基团的酶。 细菌的生长 细菌个体的生长 细菌以简单的二分裂方式进行繁殖。 繁殖一代所需时间约20-30min。 但少数细菌时间较长,如结核分枝杆菌一代为18小时。 细菌群体的生长 迟缓期 (lag phase) 对数期 (logarithmic phase) 稳定期 (stationary phase) 衰亡期 (decline phase) 细菌的生长曲线 分解代谢产物和细菌的生化反应 糖发酵试验 VP试验 甲基红试验 枸橼酸盐利用试验 吲哚试验 硫化氢试验 三、 细菌的新陈代谢 糖发酵试验 不同的细菌分解糖的能力和代谢产物不同,可以鉴别细菌。 VP试 验 大肠杆菌 产气杆菌 分解葡萄糖产酸产气 丙酮酸 乙酰甲基甲醇 甲酸、乙酸 二乙酰 碱性环境氧化 胍基 红色化合物(VP试验阳性) 产气杆菌 大肠杆菌 阴性 阳性 大肠杆菌:- 产气杆菌:+ 甲基红试验 大肠杆菌:+ 产气杆菌:- 产气杆菌使丙酮酸脱羧,形成中间产物,培养液pH5.4,指示剂呈黄色(阴性);大肠杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸,培养液pH5.4,指示剂红色(阳性)。 阳性 阴性 对照 枸橼酸利用试验 大肠杆菌:- 产气杆菌:+ 有些细菌能分解培养基中的枸橼酸盐,作为唯一的碳源生成碳酸盐,使培养基变碱性,由绿色变深蓝色。 阳性 吲哚试验 大肠杆菌:+ 产气杆菌:- 大肠杆菌,变形杆菌等含有色氨酸酶,分解培养基中的色氨酸产生靛基质(吲哚无色)。加入对二甲基氨基苯甲醛生成玫瑰色吲哚。 H2S试验 变形杆菌等能分解胱氨酸,产生硫化氢与培养基中的醋酸铅或硫酸亚铁作用,生成硫化铅或硫化铁(黑色) 。 热原质(pyrogen):产生热原质的细菌大多是革兰阴性菌,热原质即细胞壁的脂多糖。 二、合成代谢产物 毒素与侵袭性酶
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