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营养琼脂培养基适用性检查记录 样品培养基批号 包装规格 生产厂家 数量及效期 对照培养基批号 135003-201103 包装规格 9.0g/300ml 生产厂家 中国药品生物制品检定所 数量及效期 1袋 检验依据 中国药典2010年版二部 检验日期 1.菌种：大肠埃希菌 [CMCC(B)44102] 金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003] 枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63501] 2.菌液制备：取经35℃培养18～24小时的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和枯草芽孢杆菌的肉汤培养物1ml加入9ml 0.9%氯化钠溶液中，10倍稀释至10－5～10－7约为50～100cfu/ml的菌悬液，做活菌计数备用。 表1 活菌计数（cfu/ml） 稀释级 平皿 试验菌种 10－4稀释 10－5稀释 10－7稀释 1 2 1 2 1 2 金黄色葡萄球菌 87 84 大肠埃希菌 78 80 枯草芽孢杆菌 72 67 3.培养基适用性检查 3.1取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌各50～100cfu，分别注入无菌平皿中，立即倾营养琼脂样品培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，另一平皿不接种菌作空白对照，置35℃培养48小时计数。 3.2取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌各50～100cfu，分别注入无菌平皿中，立即倾营养琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，另一平皿不接种菌作空白对照，置35℃培养48小时计数。 表2 试验结果 菌种类型 样品培养基（A） 对照培养基（B） A/B% 样品培养基与对照培养基上的菌落形态对比 阴性 1 2 平均 阴性 1 2 平均 大肠埃希菌 0 65 70 67.5 0 77 79 78 86.5 菌落形态一致 金黄色葡萄球菌 0 73 68 70.5 0 80 77 78.5 89.8 菌落形态一致 枯草芽孢杆菌 0 63 57 0 菌落形态一致 4.判定标准：被检培养基的菌落数与对照培养基菌落数相比大于70%，且菌落形态大小应与对照培养基上的菌落一致。判该培养基的适用性检查符合规定。 5.结果判定： 检验人: 复核人: ZYCWJ-R-10437-00 玫瑰红钠琼脂培养基适用性检查记录 样品培养基批号 包装规格 生产厂家 数量及效期 对照培养基批号 135005-201103 包装规格 9.0g/300ml 生产厂家 中国药品生物制品检定所 数量及效期 1袋 检验依据 中国药典2010年版二部 检验日期 1.菌种：白色念珠球菌 [CMCC(B)98001] 黑曲霉[CMCC(B)98003] 2.菌液制备： 2.1取经25℃培养24小时的白色念珠球菌改良马丁液体培养物，用0.9%无菌氯化钠溶液制成1ml含菌为50～100cfu/ml的菌悬液，做活菌计数备用。 2.2接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基上，培养5天，加入3ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液将孢子洗脱。然后吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液制成1ml含菌为50～100cfu/ml的孢子悬液，做活菌计数备用。 表1 活菌计数（cfu/ml） 稀释级 平皿 试验菌种 10－4稀释 10－5稀释 10－7稀释 1 2 1 2 1 2 白色念珠球菌 65 68 黑曲霉 58 63 3.培养基适用性检查 3.1取白色念珠球菌、黑曲霉各50～100cfu，分别注入无菌平皿中，立即倾玫瑰红钠琼脂样品培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，另一平皿不接种菌作空白对照，置25℃培养72小时计数。 3.2取白色念珠球菌、黑曲霉各50～100cfu，分别注入无菌平皿中，立即倾营养琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，另一平皿不接种菌作空白对照，置25℃培养72小时计数。表2 试验结果 菌种类型 样品培养基（A） 对照培养基（B） A/B% 样品培养基与对照培养基上的菌落形态对比 阴性 1 2 平均 阴性 1 2 平均 白色念珠球菌 0 60 58 59 0 64 66 65 90.7 菌落形态一致 黑曲霉 0 50 46 48 0 55 61 58 82.7 菌落形态一致 4.判定标准：被检培养基的菌落数与对照培养基菌落数相比大于70%，且菌落形态大小应与对照培养基上的菌落一致。判该培养基的适用性检查