实时荧光定量pcr技术详解跟总结.pptVIP

* * 常规PCR重要的是终产物的定性分析，虽然有些能够根据中产物半定量，但是不够精确；实时荧光定量PCR则是伴随PCR反应监测每一个循环的产物量变化，通过对数据的分析达到队初始模板进行精确的定量。 * 介绍图 说明指数扩增的重要性 * 人为规定的阈值，去哪一点计算？消除背景干扰，在指数扩增期内， 是为了引入C(t)值概念 * 并不能解决问题。 1.Xn是荧光值 2.未知数太多 3.Ct重现性 * | Life Technologies Proprietary Confidential | * 实时定量PCR技术 目录 实时定量PCR基本原理 实时定量PCR实验材料 实时定量PCR实验方法 实时定量PCR实验结果 实时定量PCR基本原理 实时定量PCR的定义 实时定量PCR标准曲线 定量PCR技术：利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化，最终精确的对起始模板的定量分析 实时定量PCR的定义 定量PCR三个基本概念 扩增曲线 指数增长期 平台期 线性增长期 背景期 阈值与C(t)值 阈值：是循环开始3～15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍，设定在扩增曲线指数增长期 C(t)值：荧光信号（扩增产物）到达阈值时所经过的扩增循环次数 Threshold line