免疫分析技术之E点LISA王娟.ppt

免疫分析技术之ELISA 广东省功能蛋白质组学重点实验室 王 娟 ELISA 概念 酶联免疫吸附实验（Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay，ELISA）， 是在免疫酶技术(immunoenzymatic techniques) 上发展起来的一种新型免疫测定技术，基础是：抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，由此进行定性或定量分析。 基本原理 ①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。 ③在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析。 ④由于酶的催化频率很高，故可极大地地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。 　 Principle Principle Principle Assays on Uniform Polystyrene(聚