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山东部分地区禽大肠杆菌分离鉴定及耐药分直析-兽医专业毕业论文
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保密论文在解密后应遵守此规定。
论文作者签名: 益盗
导师签名: 丑骚
万方数据
符号及缩略词声明
万方数据
目 录
中文摘要 一I
Abstract . .II
1前言 1
1.1鸡大肠杆菌病的概述 ..1
1.2大肠杆菌的生物学特性 .2
1.2.1形态及染色特性 2
1.2.2培养及生化特性 2
1.2.3抗原及血清型 2
1.2.4抵抗力 .4
1.2.5致病性 4
1.3流行病学 .4
1.4临床类型及病理变化 一5
1.5{参断 6
1.5.1临床诊断 6
1.5.2病原学诊断 6
1.6耐药性研究 .7
1.6.1大肠杆菌对抗生素的耐药现状 7
1.6.2大肠杆菌耐药性研究 7
1.7大肠杆菌耐药机制研究进展 ..8
1.7.1抗生素作用位点改变或新作用位点产生 8
1.7.2酶对抗生素的修饰和破坏 ..10
1.7.3减少抗生素向大肠杆菌内的摄入 ..12
1.7.4增加抗生素从大肠杆菌向细胞外的主动排出作用 ..13
1.8耐药基因的检测方法 13
1.9鸡大肠杆菌的的防制治 14
1.9.1预防 ..14
1.9。2治疗 .15
2材料与方法 ..16
2.1材料 16
2.1.1仪器 .16
万方数据
2.1.2试剂 16
2.1.3病料 16
2.2方法 16
2-2.1溶液配制 ..16
2.2.2细菌的分离培养 .17
2.2.3细菌染色、镜检 。17
2,2.4生化试验 ..17
2.2.5药敏试验 .17
2.2.6 B内酰胺基因TEM的鉴定 17
2.2.6.1 TEM基因的PCR扩增引物设计 17
2.2.6.2 PCR产物的琼脂糖凝胶电泳 .18
2.2.7含耐D一内酰胺基因的大肠杆菌扩增 .18
2.2。8质粒DNA的提取 l 9
2.2.9测序 ..19
3实验结果 19
3.1菌落形态 19
3.2生化结果 20
3.3药敏试验 21
3.3.1一组实验结果 .22
3.3.2二组实验结果 ..23
3.3.3三组实验结果 ..23
3.4bla—tem基因的扩增结果 25
4讨论 ..26
4.1 . :16
4.2 . . . .:16
5结论 一26
参考文献 28
致谢 32
万方数据
山东农业大学硕士专业学位论文
中文摘要
近年来,随着对鸡病毒性传染病的深入研究与有效疫苗的广泛应用,鸡病毒性疾病 的发生率有所降低,但细菌性疾病特别是大肠杆菌病却日趋严重,给养殖业造成巨大的 经济损失。大肠杆菌极易产生耐药性,临床上的不规范用药进一步加剧了耐药性的发展。 许多资料表明,随着时间的推移,大肠杆菌耐药菌株越来越多,耐药谱越来越广,有的 菌株甚至对尚未广泛用于兽医临床的新型抗生素也表现出很强的耐药性。
针对这种情况,本研究对泰安及周边地区鸡大肠杆菌病的流行情况和致病性大肠杆 菌的耐药性状况进行了比较系统的调查分析:2013年4月到10月,采集了泰安及周边地 区疑似大肠杆菌病、死鸡的肝脏、心脏等样品88份,并按照不同时间段将其分成三组。 经过细菌分离培养、染色镜检、生化试验鉴定证明均为致病性大肠杆菌。按照美国临床 实验室标准化委员会(NCCLS)的判定标准,对分离得到的88株大肠杆菌对12种常用 抗生素进行药敏试验及B内酰胺药物耐药基因TEM的检测等研究。
结果表明:泰安及周边地区88株病菌对常用抗生素表现出不同程度的耐药性,耐药 范围较广,不同菌株间存有较大差异,但该地区大多数菌株对克林沙星、丁胺卡那霉素 高敏,而曾对大肠杆菌大多数菌株极为敏感的磷霉素钠和头孢噻肟产生了广泛耐药性。 不同时间段分离菌的耐药结果变化不大。药敏试验中检测出对头孢菌素类药物不敏感的 菌株进行tem基因检测,发现这些菌株均含有耐B一内酰胺酶耐药基因,与Gene bank 上登录的其他耐p一内酰胺酶耐药基因序列的同源性达到97%以上,仅存在个别的碱基 突变。通过研究以期探明地区鸡源性大肠杆菌病的流行情况和细菌的耐药现状,从而为 有效控制鸡大肠杆菌病的发生流行提供可靠的理论依据,以便制订出较为科学合理的
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