血栓与止血检验进展王鸿利.pptVIP

* （十三）血小板功能分析仪 （platelet function analyzer-100,PFA-100) 体外筛选血小板黏附和聚集的仪器。以标有胶原/腺上腺素（CEPI）和胶原/ADP（CADP）两种纤维膜为诱导剂，以观察膜孔闭合时间（closure time，CT）为结果。 参考范围 CEPI为61～203s；CADP：48 ～187s * In Vivo Haemostasis PFA100.avi capillary 200μm aperture 150μm epinephrine or ADP platelet vWF erythrocyte FLOW - 40 mbar collagen membrane PFA-100? Test Principle lumen fibrinogen platelet collagen fibrils erythrocyte endothelial cell vWF * 临床应用 一期止血缺陷的筛选试验。 敏感性：CEPI/CADP为82.5%/66.9% 特异性： CEPI/CADP为88.7%/85.5% 阴性预测值： CEPI/CADP为83%/75% 阳性预测值： CEPI/CADP为88%/79% * vWD：CEPI/CADP的敏感性为88%/87%；特异性为95%/95%。 血小板无力症：CT延长，可替代BT，准确、可靠。 服用ASA时：CEPI的CT延长，CADP可正常；与其他疾病与药物诱导血小板功能异常鉴别的敏感性和特异性分别为100%和50%。 * 方法学评价 PFA-100操作简便、快速、结果准确。CEPI/CADP的变异系数为12%/8%，与PAgT有良好相关性。 受PLT↓、贫血（Hct＜30%）、O型血型、3.8%枸橼酸盐和富含核黄素食物等的影响；Fg的裂解肽可影响 Fg-vWF/GPⅡb-Ⅲa的结合 * （十四）凝血酶生成(Thrombin generation，TGT)的检测及其临床应用 乏血小板血浆(PPP)试剂(含TF和磷脂)作用于待测血浆，激活凝血系统，最终生成凝血酶。后者将荧光底物ZGGR-AMC*转化为荧光基团AMC，AMC在390nm激发光的作用下发出460nm波长的荧光。荧光读数仪实时检测产生的荧光强度，通过电脑自动绘制凝血酶生成曲线。 * ZGGR-AMC: Z-Gly-Gly-Arg-AminoMethyl coumarin 凝血酶生成试验的原理 * CAT检测法主要有5个指标： 延迟时间(lagtime):即从反应开始到凝血酶开始生成所经历的时间(min为单位)。 峰值(peak):即生成凝血酶的最大量(nM为单位)。 达峰时间(ttpeak):即从反应开始到凝血酶达到最大值所经历的时间(为单位)。 凝血酶生成潜力(Endogenous thrombin potential,ETP): 即凝血酶生成曲线下的微积分面积，反映凝血酶的生成量(nM·min为单位)。 ETP比值：即患者ETP与正常人ETP的比值(%为单位)。 * * 凝血酶生成试验的临床应用 在低分子量肝素(LMWH)治疗中的凝血酶生成 * * * * * 检测抗凝药物治疗：例如华法林治疗(n=78)。 随着PT-INR值的递增，TGT的峰值下降，延长时间和达峰时间随之延长。 目前认为，华法林治疗要求PT-INR为2.0~3.0， PT-INR＜1.5，华法林无效； PT-INR ＜ 2.0仍有血栓可能； PT-INR ＞3.0出血事件增加， PT-INR ＞5.0出血危险度剧增。 Dieri等报道，ETP＜30%时可致出血倾向，要求抗凝治疗时ETP维持在50%为宜。若以PT-INR与ETP同时用于华法林观察，能更全面反映凝血状态。 * 附：血管性血友病（vWD）的实验诊断 血管性血友病（von Willebrand dise- ase,vWD）是由于血管性血友病因子（von Willebrand factor,vWF）合成的量或质异常所致的以皮肤、粘膜出血为特征的遗传性或获得性出血病。 * * 诊断vWD的常用检测 筛选试验：BT，APTT，BPC 诊断试验：FⅧ:C，vWF:Ag，vWF:Rcof 分型试验：vWF多聚体， vWF-胶原结合试验 （ vWF:CB）， vWF-因子Ⅷ结合 （ 试验（vWF- FⅧ:BT） * vWF-胶原结合试验 （vWF-Collagen binding assay, vWF:CB） 〔