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文件类型:作业指导书 文件编号:JCXRMYY -JY-015-2009
文件名称:临床输血检测操作规程 第01版第0次修改 第1页共12页
ABO 血型鉴定
1、测定原理
根据红细胞上有或无 A 抗原或/和 B 抗原,将血型分为 A 型、B 型、AB 型及
O 型4种。可利用红细胞凝集试验,通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正
定型,是用已知抗—A 和抗—B 分型血清来测定红细胞上有无相应的 A 抗原或/
和B抗原;所谓反定型,是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗—A
或/和抗—B。
2、标本种类及收集要求
2.1 受检者血清;
2.2 枸缘酸钠抗凝血或未稍取血,受检者血液制成5 %红细胞盐水悬液使用,
制备方法见本节附注。
2.3 标本出现中度溶血者,为不合格标本,不能用于检测。
3、仪器、试剂、校准品、质控品、培养基、以及其他所需物品
抗A、抗B血型定型试剂(单克隆抗体):河北医科大学生物医学工程中心,
产品注册号:国药准字包装:抗A、抗B各1支/盒,塑料瓶,规格:
10ml/支,储存要求:2℃~8℃避光保存,主要成分:分泌抗人 A 型和抗人 B 型
血型原单抗的杂交瘤细胞培养上清液并补加一定量小鼠腹水抗体。0.9/%的生理
盐水:江西科伦医药有限公司。离心机,显微镜。
4、操作步骤
4.1、试管法
4.1.1 取洁净小试管(内径10mm×60mm)3支,分别标明抗—A、抗—B和抗—A
十 B,用滴管分别加抗—A、抗—B 和抗—A 十 B 分型血清各 l 滴(约 50 ul)
于试管底部,再以滴管分别加入受检者5%红细胞盐水悬液1滴,混和。
4.1.2 另取洁净小试管(内径 10mm×60mm)3 支,分别标明 A、B 和 O 细胞。用
滴管分别加入受检者血清 l 滴于试管底部,再分别以滴管加入 A、B和O型5
33%试剂红细胞悬 液l滴,混和。
4.1.3 立即以1000r/min离心 3 min。
4.1.4 将试管轻轻摇动,使沉于管底的红细胞浮起,先以内眼观察有无凝集(或
溶血)现象。如内眼不见凝集,应将反应物倒于玻片上,再以低倍镜检查。
4.1.5 观察结果时既要看有无凝集,更要注意凝集强度,此有助于A、B亚型、
类B或cisAB的发现。
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批准日期: 年 月 日 实施日期: 年 月 日
文件类型:作业指导书 文件编号:JCXRMYY -JY-015-2009
文件名称:临床输血检测操作规程 第01版第0次修改 第2页共12页
4.1.6 凝集强度判断标准
4+ 红细胞凝集成一大块,血清清晰透明。
3+ 红细胞凝集成数小块,血清尚清晰。
2+ 红细胞凝块分散成许多小块,见到游离红细胞。
1+ 肉眼可见大颗粒,周围有较多游离红细胞。
± 镜下可见数个红细胞凝集在一起,周围有很多游离红细胞。
MF 混合凝集外观(mixed field)是指镜下可见少数红细胞凝集,而
极大多数红细胞仍呈分散分布。
- 表示阴性,镜下未见凝集,红细胞均匀分布。
4.2 玻片法
4.2.1 取清洁玻片 1 张(或白瓷板 1 块),用蜡笔划成方格,标明抗-A、抗-B
和抗-A十B,分别用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A十B分型血清 l滴于标明的
方格内,再各加受检者2%红细胞悬液1
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