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生物化学生物化拿学第一章蛋白质12-2
第五节 蛋白质结构与功能的关系;一、一级结构与功能的关系;;1、同功能蛋白质一级结构的种属差异与分子进化;;;; 生物 与人不同的AA数目
黑猩猩 0
恒河猴 1
兔 9
袋鼠 10
牛、猪、羊、 10
狗、驴 11
马 12
鸡、火鸡 13 ;根据细胞色素 C的顺序种属差异建立起来的进化树;2、一级结构的变异与分子病; ;正常红细胞与镰刀形红细胞的扫描电镜图;2、空间结构与功能的关系;一级结构是空间构象的基础 ; 天然状态,有催化活性;肌红蛋白与血红蛋白的结构与功能 ;;;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;;血红蛋白与氧结合的协同性;血红蛋白氧饱和度;肌红蛋白氧饱和度;;Mb和Hb的氧合曲线比较;Hb的输氧功能;血红蛋白与氧结合的分子机制; ;第六节 蛋白质的性质; 蛋白质两性解离性质和等电点;;蛋白质电泳;不同种类的蛋白质由于等电点的不同,在一个指定pH条件下所带电荷的性质和多少也不相同,加上它们分子量大小、颗粒形状的不同,因此在电场中移动的方向和速度各不相同。根据这一原理可用此方法对蛋白质进行分离和分析。
;1)圆盘电泳:玻璃管中进行的凝胶电泳。
2)平板电泳:铺有凝胶的平板上进行的电泳。
; 聚丙烯酰胺凝胶电泳
既可以作为蛋白质纯度检验方法,也可以纯化、制备蛋白质。;PAGE垂直平板电泳示意图;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;蛋白质胶体性质;+;蛋白质胶体性质的应用;透析与超过滤简易装置;蛋白质的分子量及其测定;1、沉降速度法;超离心法最为准确,但需昂贵的超速离心机。
用光学方法测定界面移动的速度即为蛋白质的离心沉降速度。
蛋白质的沉降速度与分子大小和形状有关,因为沉降系数S大体上和分子量成正比关系,故可应用超速离心法测定蛋白质分子量,但对分子形状高度不对称的大多数纤维状蛋白质不适用。;离心机结构示意图;沉降系数(sedimentation coefficient, S);
;;由沉降系数S可根据斯维得贝格〔Svedberg〕方程计算蛋白质分子的相对分子质量:
M=RST/D〔1-iρ〕
R:气体常数 T:绝对温度
D:扩散系数 i:蛋白质的偏微比容
ρ:溶剂的密度
;2、凝胶过滤(又称分子筛层析);交联葡聚糖(Sephadex);凝胶过滤法;①当kd=0时,Ve=Vo,溶质全从Vo出来, 无分配。
②当kd=1时,Ve=Vo+Vi,溶质全进筛子,各物质尽管有分配,但各物质不能分开。
③当0〈kd〈1时,Ve=Vo+kd·Vi,各溶质具不同分配,得以分离。;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;3、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳;;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;Evaluation
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