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实验二氨基酸的甲从醛滴定
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问题提出
1、滴定法一般需要用什么物质作为滴定终点的标准?
2、这里所用的指示剂是什么?
3、它PH值的变化范围是多少?
4、我们的实验目的是什么?
5、AA滴定为什么加甲醛?
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甲醛滴定的是AA哪个基团的氢?
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一 、目的与要求:
掌握甲醛滴定法测定氨基酸含量的原理和操作方法。
二、 原 理
用甲醛与氨基相互作用,使氨基上的二个氢原子被甲醛所取代生成氨基酸的二羟基衍生物。由于氨基上的氢被取代,则氨基上的H+离子解离的PK值降低到7左右,滴定终点在PH9左右,这样就可以用酚酞指示剂,用氢氢化钠来滴定-NH3+上的H+。从而计算出氨基酸的量。
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三、试剂
1、中性甲醛
2、0.5%酚酞乙醇溶液
3、标准的氢氧化钠液
4、0.01N Gly液
5、未知浓度的Gly液
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四、主要的器材
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如何正确使用滴定管?
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五、操作方法
甘氨酸氨基氮回收率
1.取锥形瓶3个,编号,向第1、2号两瓶内各加入2毫升0.01N标准甘氨酸溶液及1-2滴酚酞指示剂。向第3号瓶内加入2毫升蒸馏水及1-2滴指示剂作为对照混匀后,用0.01N标准氢氧化钠溶液滴定第1号瓶内的溶液至微红色,并保留作为掌握滴定终点的颜色标准。向第2、3号瓶内加入4毫升中性甲醛溶液混匀,分别用0.01N标准氢氧化钠溶液将它们滴定至第1号瓶颜色,将每个编号都重复操作2次,并求出甘氨酸氨基氮的平均回收率。
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编号
试剂
1
2
3
0.01M Gly液
蒸馏水
2ml
/
2ml
/
/
2ml
酚酞
2滴
2滴
2滴
0.01N NaOH液
中性甲醛
微红(作参照)
/
/
4ml
/
4ml
0.01N NaOH液
/
滴定(计数)
滴定(计数)
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