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人表皮生长因子的基因克隆与原核表达.PDF
( )
第 32 卷 第 2 期 西北农林科技大学学报 自然科学版 . 32 . 2
V o l N o
2004 年 2 月 . . . . ( . . . ) . 2004
Jou r o f N o r thw e st Sci T ech U n iv o f A gr i an d Fo r N at Sci E d F eb
人表皮生长因子的基因克隆与原核表达
1, 2 1 2 1
王保莉 , 吴方丽 , 张 涌 , 郭蔼光
( 1 西北农林科技大学 生命科学学院; 2 生物工程研究所, 陕西 杨凌 7 12 100)
( )
[摘 要] 采用 方法从人胎盘组织中扩增出 基因, 将其分别连入表达载体 4 1 + 和
R T PCR h E GF p GEX t
( ) TM
6 1 + 质粒中, 并转化入 中, 解决了大肠杆菌密码子偏爱性问题, 不需附加程序就可以
p GEX p BL 2 1 Codon p lu s
( ) ( )
编码稀有密码子的重组基因。 结果证明, 4 1 + 和 6 1 + 分别在大肠
SD S PA GE p GEX t h E GF p GEX p h E GF
杆菌 ( 3) TM 和 ( 3) TM 中获得高效表达, 目的蛋白占总菌体蛋白的
BL 2 1 D E Codon p lu s R P BL 2 1 D E Codon p lu s R IL
30% 左右。
[ 关键词] 人表皮生长因子; 基因克隆; 偏爱密码子; 基因表达
[ 中图分类号] 785 [ 文献标识码] [ 文章编号] 167 19387 (2004)
Q A
1962 年, 美国Coh en 教授在新生小鼠颔下腺的 院。
萃取液中分离出一种活性成分, 将其加入培养液中
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