中国马褂木精细胞分离技术米-南京林业大学学报.PDF

第 23 卷第 3 期 南 京 林业大 学学 报 Vol. 23 No .3 1999 年 5 月 ]ournal of Nanjing Forestry University May 1999 中国马褂木精细胞分离技术米 周坚樊汝汶 (南京林业大学森林资源与环境学院 南京 210037) 摘要 自 80 年代以来，被子植物的精细胞分离和生物学研究己成为植物受精工程中重要的 研究内容。在以前的基础上，为获得大量的中国马褂木精细胞，本研究通过黑糖密度梯度离心 法纯化萌发花粉管，用研磨法获取大量有生活力的精细胞，并利用梯度离心法纯化生活精细 胞。利用这些方法所获得的精细胞在室温的环境下可以存活 4h 左右。 关键词 中国马褂木:精细胞:分离 中图分类号 S718.3 Mass Isolation of Viable Sperm Cells from the Pollen of Liriodendron chinense Zhou Jian Fan Ruwen (College of Forest Resources and Environment Nanjing Forestry University Nanj ing 210037) Abstract Since 80 s ,the isolation and biological studies of sperm cells in angiosperms have been an impor tant research area in plant fertilization engineering. Based on the isolation of vialbe spe口n of Liriodendron chineηse ， the mass isolation of viable sperm cells form the its pollen was reported. With sugar density gra- dient centrifugation method , the germinated pollen was firstly purified. And the vialbe sperm were released by a means of the grinding method. The viable sperm was purified with sugar density gradient centrifuga tion. The testing result shows that the isolated sperm cells might survive for 4 h at r∞m temperature. Key words Liriodendron chinense; Sperm cell; Mass isolation 80 年代中期开展的植物性细胞分离技术的研究开辟了植物体外受精系统的实验研究领域，在玉米 离体受精这一模式系统之后，创建更多离体操作模式系统仍将是未来发展的动力[1]。将植物细胞工程 技术引入到林木中，发展和建立起林木离体受精实验体系将为林木遗传改良开创新途径。 生殖细胞的分离和纯化是植物生殖生物学及生殖细胞工程的发展基础之一。从植物精细胞分离技 术的实验操作本身来说，要解决的问题在于如何改进技术，以获得大量的、纯化的、高活力的精细胞[2J 。 在对中国马褂木精细胞分离的基础上，笔者试用黑糖梯度离心和研磨法处理萌发的花粉，以期提高精细 胞的产量和分离效率。 * 收稿日期 1999-01 -14 修改稿收到日期 1999-04 -27 兴 江苏省自然科学基金资助项目(BK97148