第3章_分子标记辅助育种.pptVIP

我国目前玉米生产上利用的九种主要 杂种优势模式： Reid×温热I Reid×自330 Reid×唐四平头 Reid×旅大红骨。 Lancaster×唐四平头 自330×Lancaster Lancaster×旅大红骨 Reid×Lancaster 自330×温热I 分子标记的杂合度与杂种优势的关系 利用豫玉22号的294个重组近交系，通过3次两两随机交配的方式组配成441个“永久F2”；选用221个亲本（综3和87－1）存在多态性的SSR标记对294个重组近交系进行多态性分析，同时对永久F2群体进行田间鉴定，结果表明：亲本的杂合度与永久F2杂交种的产量不存在显著的相关关系。 分子标记用于转基因作物后代 的选择与检测 转Bt基因玉米的PCR检测结果 转基因亲本的Southern检测结果 1：MK；2：CK+，Bt质粒；3：CK-；4-13：转基因亲本 分子育种学 分子标记技术 转基因技术 常规育种技术 经验、机遇 科学、技术 思考题 1、何谓遗传图谱？ 2、简述RFLP、RAPD、STS、SSR、AFLP标记的原理和特点。 3、DNA分子标记应用。 4、DNA分子标记辅助育种的原理和方法，以及它的优点。 谢 谢！ * * * 1、合适分子标记的选择 针对目标基因进行间接选择的分子标记，只要与目标基因紧密连锁，原则上可选用任何一种分子标记进行，但以易于检测、重演性好的为佳，如SSR，AFLP，RFLP等。 针对供体亲本进行遗传背景清除的分子标记，最好是选择以PCR反应为基础的易于检测，且多态性高的分子标记，如RAPD、SSR和AFLP等 2、亲本多态性筛选 这是MAS过程中最关键也最为重要的一环。 一般来说，针对供体亲本进行遗传背景清除，需要有250个左右能覆盖全基因组的有多态性的分子标记（见左图），并在每条染色体上均匀地分布，具体数目可以随基因组大小的不同而有所差异； 杂交亲本间分子标记多态性频率的高低主要与所用亲本的亲缘关系远近有关。双亲亲缘关系远的，其分子标记的多态性频率就高，反之亦然。 具体筛选时是逐条染色体均匀地进行，直到所需要的量为止。 变异系数 标记数量 当群体大小一定时，采用不同数量的标记所求得的遗传背景恢复率变异系数是不同的，所采用的标记数量越多，通过分子标记所计算出的群体遗传背景回复率越准确，其变异系数越小。当达到250个以后，其变异系数就基本上不再变化。 3、目标性状的间接选择 执行世代：除F1以外的全部转育世代 选择依据：紧密连锁 4、轮回亲本的遗传背景恢复 执行世代：BC1F1至BC2F1或BC3F1 选择目标：99.99% III、分子标记辅助的回交育种模式图 待改良亲本 ? 含有目标基因的供体亲本 待改良亲本 ? F1 待改良亲本 ? BC1F1（PCR分析选阳性单株， AFLP分析 选待改良亲本遗传背景最多者） 待改良亲本 ? BC2F1（PCR分析选阳性单株， AFLP分析选 待改良亲本遗传背景最多者） BC3F1 （PCR分析选双交换阳性单株） BC3F2 （PCR分析选目标改良体） 目标改良体的繁殖、鉴定与推广 ? ? （二）、 MAS技术在杂交育种程序中的应用 与目标性状紧密连锁分子标记的筛选 自F2代开始，针对目标性状进行连续2-3代的间接选择； 农艺性状的综合选育与评价 五、MAS技术在作物育种程序中成功应用的实例 （一）、目标质量性状的选择 例1 明恢63 ? IRBB21 明恢63 ? F1 明恢63 ? BC1F1（标记248的PCR分析和白叶枯病菌株ZJ173接种 鉴定选择到49个抗性单株，标记AB89的PCR分