基因工签程12.pptVIP

①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为 。 ②在第 轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。 (2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图)，请分别说明理由。 15/16 三 ①第1组： ； ②第2组： 。 (3)PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为 。 引物Ⅰ和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效 引物Ⅰ′自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效 DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双 链DNA片段的引物链上 (4)用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1kb即1000个碱基对)，请在下图中画出质粒上EcoRⅤ、MboⅠ的切割位点。 答案如右图： 【考查类型】本题主要考查基因工程中PCR的操作过程及限制酶在质粒上切割位点的特点。 【解析】(1)根据题意，PCR前三轮循环示意图如下： 从图中可知，在第3轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段(占1/4)。第一轮循环产物中不含引物A的DNA片段是一个，第二轮循环产物中不含引物A的DNA片段是1个，第三轮产物中不含引物A的DNA片段也是一个，同理可推知第四轮产物中不含引物A的DNA片段也是一个，第四轮产物中DNA片段共有16个，所以第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为15/16。 (2)引物设计的要求之一是引物必须与待复制的DNA片段的一条链准确配对，但第1组引物中引物Ⅰ和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效，第2组引物中的引物Ⅰ自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效。 (3)DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上，而表达式中是直接将两个脱氧核苷酸直接相连。 (4)由图可知，质粒DNA分子的长度是14kb，EcoR V在质粒上有一个切割位点；Mbo Ⅰ在质粒上有两个切割位点，这两个切割位点的距离是2.5kb，其中一个切割位点与EcoR V的切割位点相距6kb，另一个切割位点与EcoR V的切割位点相距5.5kb。 【方法归纳】本题立意在基因工程的基本工具和操作程序，要准确作答，必须对相关过程达到深刻理解的程度。为了便于推算有时要画出示意图帮助理解。 课时练习七十五 一、选择题(每小题只有一个正确选项) 1．有关基因工程的叙述正确的是( ) A．限制性内切酶只在获得目的基因时才用 B．重组质粒的形成在细胞内完成 C．质粒都可作运载体 D．蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 D 2．下列关于染色体和质粒的叙述，正确的是( ) A．染色体只存在于真核生物细胞中，质粒只存在于原核生物细胞中 B．染色体和质粒均与生物的遗传有关 C．在基因工程中染色体和质粒均可以作为运载体 D．染色体和质粒的化学本质相同 B 3．下列叙述符合基因工程概念的是( ) A．B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因 B．将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株 C．用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株 D．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上 B 4．下表有关基因表达的选项中，不可能的是( ) 兔血红 蛋白 兔成熟 红细胞 兔血红蛋 白基因 D 动物胰 岛素 大肠杆菌 工程菌细胞 动物胰岛 素基因 C 人酪氨 酸酶 正常人皮 肤细胞 人酪氨酸 酶基因 B 细菌抗虫 蛋白 抗虫棉叶 肉细胞 细菌抗虫 蛋白基因 A 表达产物 表达的细胞 基因 D * 高 考 回 眸 自 主 梳 理 基因工程的概念 结果 基本过程 操作水平 操作对象 操作环境 基因工程的别名 DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 人类需要的新生物类型和产品 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 二．基因工程的基本操作工具 (1)限制性核酸内切酶——“分子手术刀” ①来源：主要从