动物细胞融军合与单克隆抗体1.pptVIP

2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体 材料1: 1970年，有两位科学家做了一个人—鼠细胞融合的实验，以证明细胞膜的流动性。那么，如何实现人—鼠细胞的融合，动物细胞融合后还有什么用途呢？ 材料4：效应B淋巴细胞在体内只能由B淋巴细胞增殖分化而来,不再进行分裂,在体外培养的条件下，也很难分裂。 材料5： 1975年, 米尔斯坦和柯勒首先将抗原注射入小鼠体内，然后从小鼠脾脏中获得能够产生抗体的B淋巴细胞，与小鼠骨髓瘤细胞融合，得到多种杂交细胞。 在特定的选择性培养基中可筛选出杂交瘤细胞。 经过再次筛选和抗体检测,得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞。但纯度达不到100%。 对单一杂交瘤细胞进行克隆培养,获得足够数量的细胞，在体外培养或注射到小鼠体内增殖。从细胞培养液或小鼠的腹水中，可提取出大量抗体。 （由于产生抗体的细胞来自一个杂交瘤细胞,故产生的抗体称为单克隆抗体.） 单克隆抗体的应用信息 5. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是 （ ） ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞　 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A.②④ B.①③⑤　　 C.①②③④ 　 D.②③ * 植物细胞A 植物细胞B 去掉细胞壁 去掉细胞壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 杂合的原生质体 再生出细胞壁 杂种细胞 细胞分裂 分化发育 愈伤组织 杂种植株 温故知新: 植物体细胞杂交过程 人-鼠(想像图) 植物细胞A 植物细胞B 去掉细胞壁 去掉细胞壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 杂合的原生质体 再生出细胞壁 杂种细胞 细胞分裂 分化发育 愈伤组织 杂种植株 如何实现人—鼠细胞的融合？阅读教材52页相关内容，思考下列问题： 思考： 1、动物细胞融合的概念是什么？ 2、动植物细胞在结构上有何区别？这对它们杂交或融合过程有什么影响？ 3、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？那动物细胞融合呢？ 4、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同？是什么原理？ 5、动物细胞融合有什么意义？主要应用在哪些方面？ 6、参照植物细胞杂交过程写出动物细胞融合过程。 动物细胞A 动物细胞B 诱导、融合 杂合的细胞 有丝分裂 2个完整的杂交细胞AB 如何实现人—鼠细胞的融合？阅读教材52页相关内容，思考讨论下列问题： 小组活动， 讨论： 7、植物体细胞杂交可得到杂种植株，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗?为什么？ 植物细胞A 植物细胞B 去掉细胞壁 去掉细胞壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 杂合的原生质体 再生出细胞壁 杂种细胞 细胞分裂 分化发育 愈伤组织 杂种植株 获得杂种植株 物理、化学方法 （同左） 灭活的病毒 　　 物理（离心、振 荡、电激） 化学（聚乙二醇） 直接诱 导细胞融合 去壁—原生质体 融合—诱导新壁 —杂种植株 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 结果　 诱导方法 步骤　 融合的原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 植物、动物细胞融合的比较 获得杂种细胞 小结1 材料2：在基因工程中,采用抗原-抗体杂交法检测基因表达产物需用到纯度很高的抗体。 材料3：传统获得抗体的方法：把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需抗体。 用这种方法获得的抗体，不仅产量低，而且抗体的特异性差，纯度低，反应不够灵敏。 思考： 1、抗体由哪种细胞产生的？ 2、抗体的传统生产方法的缺陷是什么？ 3、能否通过相应效应B细胞体外培养的方式大量获得抗体? 提示： 1 .什么细胞可以产生抗体？ 2 .什么细胞可以无限增殖？ 思考：用什么方法才能让B淋巴细胞在体外培养时既能产生抗体又能无限增殖? 请根据以上材料,讨论设计单克隆抗体制备过程图. 讨论： B淋巴细胞 注射特定抗原蛋白 骨髓瘤细胞 培养骨髓瘤细胞 融合 多种杂交细胞 在具有筛选作用的培养基上培养 专一抗体检验阳性 克隆上述杂交细胞 单克隆抗体的制备过程 分开不同杂交细胞，克隆专一抗体， 检验阳性细胞 专一抗体检验阳性 单克隆抗体 注射到小鼠体内 体外培养 单克隆抗体 结合单克隆抗体的制备过程，思考以下问题： 1、（只考虑两两融合）融合细胞几种类型？ 2、本过程中进行了两次筛选，目的分别是什么？第1次筛选要淘汰哪些细胞？ 3、本过程利用的那些技术？ 4、杂交瘤细胞有何特点？ 材料6： ①诊断疾病（识别作用，如同位素标记单克隆抗体，可诊断肿瘤、