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质粒小量提取实验;基因工程:目的基因,载体,宿主细胞
质粒广泛用作基因工程中目的基因的运载工具——载体。
质粒:游离于细菌或低等真核细胞染色体外、具有自主复制能力的共价闭合环状的DNA。
从大肠杆菌中提取质粒DNA是一种分子生物学最基本的方法。;碱裂解法是一种应用最为广泛的制备质粒DNA的方法,基本原理:
当菌体在NaOH和SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,当加入酸性中和液后,质粒DNA分子能够迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清中;蛋白质与染色体DNA不复性而呈絮状,离心时可沉淀下来。 ;操作步骤;注意事项:;思考题
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