含有甲烷氧化菌混合菌群特性研究.pdf

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 !（）： # #% ’ #%( 年 月 日 $%% $ ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ ! )*+,-.,/ $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 含有甲烷氧化菌的混合菌群特性研究 罗明芳，吴 昊，王 磊，邢新会 （清华大学化工系生物化工研究所 北京 #%%%4! ） 摘 要：为获得高效甲烷氧化微生物体系，从农业土壤中采样，以甲烷作为唯一碳源进行好氧选择性传代培养，得 到生长性能稳定、生长优于 纯培养的具有甲烷单加氧酶（ ， ） !#$%’()*+( #,)-$’(.’,)+/ FG+ H*:.;* HD;DD6/*;.?* HHF 活性甲烷氧化混合菌。利用HHF 的共代谢特性，分别以苯酚和环氧丙烷作为目标对象，考察该混合菌对有机污染 物的降解及用于生产有用化学物质的催化特性。结果表明，所得混合菌具有高效降解苯酚能力，对初始浓度为 的苯酚，经过 培养，苯酚降解率可达 。另外，以该混合菌为催化剂可以实现丙烯氧化生产环氧丙 0%%8IJ ##: (( K 烷。通过降低磷酸盐浓度可以有效提高环氧丙烷的积累浓度，最大可至188D3I J。此外，采用纯种分离方法结合 扩增、 和 功能基因分析技术对混合菌群结构进行解析。结果表明，该混合菌群由 型甲烷氧化 LMN #0O ,NPQ HHF ! 菌及其它至少 种非甲烷氧化菌组成，它们分别属于 和 、 ! !#$%’()*+( #,)-$’(.’,)+/ 0-)*#’12-#, 3 +*)) 4+. ,)25)6+( 、 和 。采用 方法从混合菌及纯化菌株 /#2)6+,2*( 4’/2/’*2( #(#’(#,’*) 7#*’#,’.$’/’*2( /2#’.$))2 LMN ! @ 总 中都能扩增得到 、 和 基因片段，表明该甲烷氧化菌同时具有 和 #,)-$’(.’,)+/( R( SPQ //’8 //’9 ./’0 ?HHF THHF 两种形式的HHF。通过对从甲烷氧化混合菌中分离纯化得到的甲烷氧化菌进行LMN 产物测序，结果发现其 与!#$%’()*+( #,)-$’(.’,)+/ 的同源性为(( U( K 。 关键词：苯酚；环氧丙烷；甲烷氧化菌；混合菌； !#$%’()*+( #,)-$’(.’,)+/ 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） V(( U( Q %%%#50$%( $%% %#5%#%5%